Описание исследования

Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка) — условно-патогенная грамотрицательная палочковидная подвижная строго аэробная (живущая только при доступе кислорода) бактерия. Она широко распространена в окружающей среде, однако наибольшее значение для ее циркуляции имеет вода. В водной среде при температуре 37°С бактерия может выживать на протяжении года. Также «комфортной» средой обитания для нее являются многие медицинские растворы. Синегнойная палочка может входить в состав нормальной микрофлоры организма: ее обнаруживают на коже паха, области подмышек, носа, ушей, в глотке, желудочно-кишечном тракте.

Болезнетворное действие синегнойной палочки обусловлено образованием экзотоксинов и высвобождением эндотоксинов, происходящем при гибели клеток. Так, например:

• экзотоксин А способствует нарушению синтеза белка;
• экзоэнзим S способствует развитию серьезных патологий в легких;
• цитотоксин снижает сопротивляемость организма бактериальным и грибковым инфекциям за счет уменьшения количества белых кровяных клеток (нейтрофилов) и цитолиза (разрушения) других клеток;
• гемолизины способны высвобождать гемоглобин из эритроцитов крови, после чего он растворяется в плазме или окружающей жидкой среде (кровь при этом становится прозрачной).

Среди продуктов жизнедеятельности бактерий патологическую значимость имеют:

• энтеротоксический фактор, который предположительно отвечает за возникновение диареи при инфицировании синегнойной палочкой;
• фактор проницаемости;
• нейраминидаза, разрушающая нейраминовую кислоту, вследствие чего облегчается доступ микробов в ткани организма;
• протеалитические ферменты.

Хотя синегнойная палочка характеризуется высокой степенью болезнетворности, она редко поражает людей с нормальной сопротивляемостью организма и неповрежденными анатомическими барьерами. Ее мишенью обычно становятся лица с ослабленным иммунитетом, пожилые люди и дети. Pseudomonas aeruginosa является самым частым возбудителем нозокомиальных (внутрибольничных) инфекций, в частности:

• пневмоний;
• воспалительных процессов мочеполовой системы;
• гнойных хирургических инфекций (показателем заражения является окрашивание перевязочных средств в сине-зеленый цвет);
• первичной (в отсутствии установленного очага инфекции) грамотрицательной бактериемии (патологии, характеризуемой наличием живых бактерий в кровотоке).

По имеющимся данным, на ее долю приходится 15-20% случаев внутрибольничного инфицирования.

Синегнойная палочка часто поражает:

• больных с ожогами;
• лиц, страдающих мочекаменной болезнью и заболеваниями мочевого пузыря;
• лиц с врожденными пороками развития половых органов;
• лиц, постоянно или часто подвергающихся катетеризации;
• пациентов после операции по удалению предстательной железы.

Синегнойные палочки занимают одно из первых мест среди возбудителей инфекций, развивающихся в пересаженной почке.

Синегнойная палочка - один из самых сложных для лечения микроорганизмов. Это объясняется ее способностью быстро эволюционировать, а также общаться и координировать поведение с помощью сигнальных молекул (т.н. «чувство кворума» — некий аналог социального поведения). Для защиты колонии от действия антибиотиков синегнойные палочки образуют укрывающие их биопленки.

Инфицирование Pseudomonas aeruginosa чаще всего происходит при нарушении правил использования, хранения и стерилизации медицинских растворов и инструментов (игл для поясничной пункции, мочевых и сосудистых катетеров).

Синегнойная палочка отличается устойчивостью к действию антисептиков и дезинфицирующих средств (некоторые из них она способна нейтрализовывать), сохраняет жизнеспособность в растворе фурацилина. Бактерия реагирует на вещества, содержащие хлор, чувствительна к высушиванию, воздействию давления и высоких температур. Главным средством профилактики инфицирования синегнойной палочкой было и остается соблюдение правил асептики (предохранения от заражения при операциях и лечении ран) и антисептики (мероприятий по уничтожению микроорганизмов).

Обследование проводится методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Данный метод позволяет выявить в исследуемом биологическом материале (урогенитальном соскобе, соскобе с задней стенки глотки, в моче, сперме) специфические фрагменты ДНК синегнойной палочки.

Подготовка к исследованию

Соскоб урогенитальный (цервикальный канал, влагалище, уретра)

Соскобы у женщин отбираются не ранее пятого дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.

Требования по подготовке к тестированию:

• за день до и непосредственно в день отбора материала запрещено спринцевание влагалища;
• накануне исследования запрещено применение вагинальных препаратов – мазей, свечей и т.п.

Проба не отбирается:

• параллельно с приемом внутрь или местным применением антибиотиков – после окончания курса лечения должно пройти не менее двух недель при местной терапии и 30 дней после внутреннего приема антибактериальных препаратов;
• во время менструации;
• ранее, чем через 24-48 часов после полового контакта;
• после внутривлагалищного УЗИ;
• после колькоскопии (диагностического осмотра входа во влагалище, его стенок и шейки матки при помощи специального прибора – кольпоскопа);
• после мануального исследования и прочих манипуляций.

Мочеиспускательный канал (уретра)

У лиц обоего пола проба отбирается не ранее чем через 14 дней после применения антибиотиков местного действия и 30 дней после перорального приема противобактериальных средств.

За неделю до манипуляции рекомендуется прекратить прием всех медицинских препаратов. Если отказ от лечения невозможен, то пациенту необходимо поставить об этом в известность специалиста, направляющего его на обследование.

За 48 часов не вступать в половые контакты и не мастурбировать.

При отборе эпителиальных клеток из мочеиспускательного канала, манипуляция проводится перед мочеиспусканием или через 2-3 часа после него (при обильных выделениях из уретры у мужчин – через 1 час).

Соскоб с задней стенки глотки

Перед отбором биологического материала необходимо учесть следующее:

• соскоб клеток, отбираемый с целью диагностики, проводится перед началом применения противобактериальных, антивирусных и противопаразитарных лекарственных средств, а также до проведения любых лечебных или диагностических мероприятий;
• отбор пробы для наблюдения за эффективностью проводимой терапии осуществляется минимум через полторы-две недели после окончания использования лекарственных средств местного действия и минимум через месяц после общего лечения.

При подготовке к взятию соскоба:

• запрещено применение препаратов для рассасывания и/или аэрозолей для орошения ротоглотки в течение 6 часов, предшествующих отбору пробы;
• запрещено использование для освежения дыхания жевательной резинки или пастилки;
• запрещено чистить зубы.

Перед проведением соскоба необходимо прополоскать рот, используя для этого воду комнатной температуры.

Для получения корректного результата тестирования все эти условия необходимо соблюсти в точности. Лечащий врач может рекомендовать иные условия проведения обследования.

Сперма

Отбор материала с целью диагностики проводится до начала противобактериального, антивирусного и противопаразитарного лечения, химиотерапии, а также до лечебных или диагностических мероприятий в месте предполагаемой локализации агента инфекции. После курса лечения проба отбирается не ранее, чем через 10-14 дней при проведении локальной терапии и через 30 дней после перорального приема антибиотиков.

Сбор спермы (эякулята) проводится посредством мастурбации в стерильный медицинский контейнер, плотно закрывающийся крышкой. Проба не отбирается в ранее использовавшиеся и вымытые или обработанные средствами дезинфекции емкости. Не рекомендуется сдавать анализ при наличии обильных гнойных выделений из мочеиспускательного канала.

После сбора материал может храниться в холодильнике при температуре +2 - +8⁰С, но не более 10-12 часов.

Моча

На анализ собирается порция первой утренней мочи, выделенной не ранее, чем через 2-3 часа после предыдущего (ночного) мочеиспускания. Ее объем должен составлять порядка 20-30 мл. Емкость, используемая для сбора биоматериала – стерильный медицинский контейнер.

Моча собирается либо до проведения химиотерапии или лечения антибиотиками, либо через месяц после окончания курса лечения.

Перед началом манипуляции необходимо тщательно обмыть гениталии. Женщинам желательно воспользоваться гигиеническим тампоном во избежание попадания в пробу слизи из влагалища. Во время менструации материал не собирается.

После наполнения контейнера на треть-половину объема, емкость с мочой плотно закрывается крышкой, дабы избежать ее вытекания.

Доставка биоматериала должна быть организована в течение максимум 6 часов. До отправки в лабораторию моча может храниться как в холодильнике (при t⁰ от +2⁰С – замораживать ее нельзя), так и в комнате, но при этом температура не должна быть выше +25⁰С.

Показания к исследованию

Тестирование проводится для выявления наличия специфических фрагментов ДНК синегнойной палочки в исследуемых образцах биоматериала с целью:

• идентификации возбудителя патологии при внутрибольничных инфекциях;
• обследования лиц с ослабленным иммунитетом;
• оценки действенности проведенного лечения (не ранее чем через 30 дней после окончания курса приема антибиотиков).

Интерпретация исследования

Данный тест – качественный, результат выдается в формулировках «обнаружено» или «не обнаружено».

Нормой является отсутствие в исследуемой пробе специфических фрагментов ДНК Pseudomonas aeruginosa.

Положительный результат:

• в исследуемых образцах обнаружены специфические фрагменты ДНК синегнойной палочки.

Отрицательный результат:

• специфические фрагменты ДНК Pseudomonas aeruginosa не обнаружены;
• количество агента инфекции ниже порога обнаружения.

Результат анализа выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример результата по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович                                       Пол: м            Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000