Описание исследования

Гистологический анализ – это наиболее информативный и точный метод диагностирования разных заболеваний. Оно проводится во всех без исключения случаях при удалении органов, частей тела или иссечения тканей независимо от вида патологии и показаний к хирургическому вмешательству. Цель его проведения:

• определение или подтверждение клинического диагноза и его осложнений;
• определение характера патологии (воспалительного, дегенеративного, предракового);
• диагностика инфекционных, аутоиммунных заболеваний;
• определение обоснованности назначенной терапии;
• оценка эффективности проводимого лечения.

Наибольшее значение гистология имеет в диагностике предраковых и раковых заболеваний (при подозрении на онкологию гистологическое исследование проводится в обязательном порядке).

В рамках данного теста проводится исследование биопсийного материала костной ткани.

Биопсия кости – это отбор фрагмента костной ткани для последующего исследования, прежде всего, с целью дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей. Ее проводят в тех случаях, когда результаты КТ, МРТ, рентгенографии не дали требуемого объема информации.

Гистологическое исследование костной ткани проводится с помощью электронного микроскопа. Перед его проведением материал проходит несколько стадий обработки.

1. Фиксация. Отобранный при биопсии материал погружается в фиксатор, что позволяет предотвратить процессы аутолиза (самопереваривания) тканей за счет денатурации белков (изменения их естественных свойств под действием дестабилизирующих факторов). В качестве фиксатора используется 10%-ный раствор нейтрального забуференного формалина. Он наливается в предварительно подготовленную чистую сухую посуду с герметичной крышкой или пробкой в количестве не менее чем в 10 раз больше объема фиксируемого материала. Запрещается применение просроченного или имеющего более высокую концентрацию фиксатора. Для хранения и транспортировки мелких фрагментов материала запрещено использовать посуду из темного, не обладающего достаточной прозрачностью, стекла с узким горлышком (за качество доставляемого на исследование материала, несет ответственность врач, давший направление). Это требование объясняется тем, что для контроля фиксации необходимо, чтобы образец был хорошо просматриваемым. Узкое горлышко недопустимо, поскольку при фиксации материал уплотняется, что может стать препятствием для его извлечения. Обычно биопсийный материал погружается в фиксатор на 6-12 часов, максимум – на сутки. После извлечения он в течение нескольких часов промывается под проточной водой.

2. Обезвоживание и уплотнение. Для обезвоживания образца используется этиловые спирты разной концентрации, в которые на сутки по очереди погружается материал. Материалом для уплотнения является парафин. Подготовляемый образец ткани помещается в смесь ксиол-парафин, а затем в жидкий парафин. После остывания и затвердения парафина из него вырезается блок, содержащий исследуемый материал, который закрепляется на деревянном кубике.

3. Приготовление срезов. Кубики парафина с образцом помещается в микротом – специальное приспособление для приготовления тонких тончайших (в несколько микрон) срезов заданной толщины. Срез делается микротомным ножом, шаг которого регулируется микрометрической механической системой, перемещающей кубик на заданное расстояние. Полученные срезы помещаются для расправления в теплую воду, а затем – на предметное стекло.

4. Окрашивание и консервация. Перед окрашиванием полученный образец освобождается от парафина посредством последовательного погружения в растворители. Затем предметное стекло со срезом на короткое время помещается в раствор красителя и промывается водой. После этого образец опять обезвоживают посредством спиртов различной концентрации и просветляют для удаления излишков краски. Для окрашивания костной ткани применяется раствор тионина (метод Шморля). При этом стенки полостей и канальцев кости, выстланных сетью коллагеновых волокон, приобретают темно-коричневый цвет, а фон – светло коричневый.

Перед окраской костная ткань проходит дополнительную обработку – декальцинацию, посредством которой кислотами проводится извлечение из образца солей кальция. После декальцинации материал выдерживается в растворе алюмокалиевых квасцов.

Для консервации на образец наносится канадский бальзам, после чего препарат накрывается покровным стеклом. При правильно проведенной процедуре подготовки образец может храниться неопределенно долгое время.

Показания к исследованию

Исследование биопсии костной ткани проводится с целью

• дифференциальной диагностики опухолевых, предопухолевых и неопухолевых заболеваний;
• определения характера патологического процесса, его распространенности;
• выявления механизмов, ведущих к утрате костной ткани;
• определения степени влияния различных экоантропогенных факторов (экологических факторов, обусловленных различными формами воздействия человека на природу, влияющих на количественные и качественные изменения её составляющих) на процессы перестройки кости;
• оценки качества кости;
• определения действенности проводимой терапии.

Показанием к проведению гистологического исследования костной ткани является наличие:

• опухоли;
• хронического остеомиелита (гнойно-некротического процесса в костях, костном мозге и прилегающих мягких тканях вследствие поражения производящими гной бактериями);
• абсцесса Броуди (сохраняющегося годами до перехода в хроническую форму подострого остеомиелита);
• туберкулеза кости (прогрессирующего разрушения костей инфекционной природы, характеризуемого образованием в костной ткани специфических гранулем);
• разрушения костей неясной этиологии;
• неподдающихся лечению болезни костей.

Также гистологическое исследование костной ткани проводится в тех случаях, когда проведение рентгенографии, МРТ, КТ не дало врачу достаточного количества информации о заболевании.

Подготовка к исследованию

При сдачи данного анализа необходимо заполнить анкету.

Подготовка пациента проводится перед операцией. Гистологическое исследование материала предварительной подготовки не требует.

Материал для гистологического исследования на пункт по забору биоматериала может доставить:

• врач;
• медсестра стационара;
• сам пациент.

Доставка материала, предназначенного для гистологического исследования, осуществляется в плотно закрывающейся емкости с 10%-ным забуференным формалином во избежание испарения формалина и высыхания биоматериала (соотношение объема исследуемого материала к объему формалина должно составлять не менее 1:10).

Материал в виде слизи, крови, экссудата или очень мелких (менее 1 мм) фрагментов не может расцениваться, как полноценный для гистологического описания. Подсохший, загнивший, замороженный, нефиксированный материал на исследование не принимается, о таких фактах сообщают администрации учреждения.

На емкости с материалом должна быть указана следующая информация:

• фамилия и инициалы пациента;
• дата его рождения.

Медсестра, осуществляющая прием материала на заборном пункте, наносит на емкость маркировку, содержащую код и номер в соответствии с документами.

Вместе с материалом должно быть предоставлено направление на стандартном бланке, в котором разборчиво указана следующая информация:

• фамилия имя отчество пациента (полностью);
• его дата рождения;
• диагноз;
• код МКБ;
• фамилия имя отчество врача, направляющего материал на исследование;
• его подпись и печать.

Данный документ полностью заполняется и подписывается лечащим врачом. Если пациент пришел с сопроводительным направлением от врача, то администратор переписывает данные из этого направления в утвержденный бланк. Если такое направления отсутствует, ответственное за прием материала лицо обязано выяснить у пациента данные направлявшего врача: ФИО, название лечебного заведения и контактный телефон (если он известен пациенту). Администратор пункта по забору материала созванивается с врачом и с его слов заполняет направление на гистологическое исследование.

Интерпретация исследования

Результат выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука» и содержит информацию:

• об исследуемом материале и методе его получения;
• о клиническом диагнозе;
• об имеющихся изменениях в исследуемой ткани.

На основании проведенного исследования специалистом делается микроскопическое описание, в котором может быть обозначен клеточный состав исследуемого материала, подтверждаться наличие/отсутствие атипичных клеток и/или воспалительного процесса.

Если клинический случай не представляет сложности и картина является банальной, микроскопическое описание не делается, а заключение содержит только гистологический диагноз.

Если в процессе исследования в материале не обнаружены специфичные морфологические изменения, которые бы прямо свидетельствовали о наличии какого-либо конкретного заболевания, или клиническая картина недостаточно представлена, гистологическое заключение может выдаваться в описательной форме.

При доставке материала, не отвечающего требованиям, возможно получение ложноотрицательного результата. В частности, такая вероятность велика при предоставлении скудного образца ткани, которая не попала в зону поражения патологическим процессом. Отсутствие или непринятие в учет важных клинико-лабораторных сведений о пациенте может стать причиной выдачи ложноположительного результата.

Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванова Ирина Ивановна           Пол: ж                Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата исследования: хх.хх.хххх