Описание исследования

Энтеровирусы входят в семейство пикорнавирусов. «Носителем» информации у них является РНК. Энтеровирусная инфекция распространена очень широко, заболеть ею может любой человек независимо от возраста. Однако наибольшую опасность она представляет для детей. Наличие инфекции в организме не всегда очевидно – в большинстве случаев (85%) она никак не проявляется, в 12-14% случаев имеет вид легкой или средней по тяжести простуды. Всего 1-3% заразившихся болеют тяжело. Лабораторными методами данная инфекция подтверждается только при тяжелом течении заболевания или при вспышках эпидемий.

Энтеровирусы бывают разных видов и типов. Один из них – полиомиелитный энтеровирус. Поскольку против него существует действенная вакцина, количество заболеваний, вызываемых этим видом вируса, сведено к минимуму.

Известно 70 серологических типов энтеровируса, которые опасны для здоровья человека:

*Коксаки, эховирусы (ЕСНО) – вирусы из рода энтеровирусов.

Наибольшую активность энтеровирусы проявляют летом и осенью. Чаще всего заражение происходит через воду, пищу, предметы обихода. Однако не исключено инфицирование воздушно-капельным путем, а также внутриутробное поражение ребенка (трансплацентарный путь). На способ заражения оказывают влияние разновидность энтеровируса, условия жизни, длительность заболевания.

Первичная «база» размножения вируса – желудочно-кишечный тракт. После попадания в кровь агенты инфекции разносятся по всему организму и поражают внутренние органы, где они задерживаются для вторичного размножения. Энтеровирусы содержат дыхательные секреты и кал зараженных людей. Иногда возбудитель инфекции обнаруживается в крови или спинномозговой жидкости.

Энтеровирусная инфекция обладает одной особенностью, затрудняющей диагностику: представители вируса, относящиеся к одному серологическому типу, могут быть причиной различных форм болезни, в то время как возбудители, относящиеся к разным серотипам, обуславливают заболевания со сходными проявлениями. Перечень серотипов вируса, у которых симптомы строго определены и присущи только им, невелик. Кроме того, клинические проявления, сопровождающие энтеровирусную инфекцию, не являются определяющими только для нее, но могут проявляться и при болезнях, вызванных другими возбудителями.

Заболевания, причиной которых становится заражение энтеровирусом, условно делятся на два типа – менее и более тяжелые. К первой категории относятся:

• трехдневная лихорадка, которая может сопровождаться сыпью или протекать без нее;
• герпангина – острая вирусная болезнь, сопровождаемая резким повышением температуры, болью в горле, поражение слизистой оболочки и пр.;
• плевродиния – острая инфекция, характеризующаяся типичными для нее болями в груди и лихорадкой;
• везикулярный фарингит – воспаление слизистой горла с последующим высыпанием на миндалинах, небе, маленьком язычке, сопровождаемое очень высокой температурой;
• конъюнктивит – воспаление слизистой оболочки глаза (конъюнктивы);
• увеит – воспаление сосудистой оболочки глаза;
• гастроэнтерит (воспаление желудочно-кишечного тракта).

Вторая группа болезней представляет потенциальную угрозу жизни человека:

• менингит – воспаление оболочек головного и спинного мозга;
• энцефалит – воспаление головного мозга;
• острый паралич;
• миокардит – поражение сердечной мышцы;
• перикардит – заболевание «околосердечной сумки», часто сопровождаемое скоплением в ней жидкости;
• гепатит – воспаление печени;
• хронические инфекции у лиц с ослабленным иммунитетом;
• септикоподобные состояния у младенцев.

Выявление энтеровирусов в лабораторных условиях производится выделением возбудителей в культуре клеток и методом полимеразной цепной реакции, при котором количество специфических фрагментов РНК, характерных для вируса, многократно увеличивается. Второй способ исследования является более чувствительным и менее затратным по времени.

Преимуществом ПЦР является возможность выявления РНК, общего для всех представителей рода (выявление антител позволяет обнаружить только 11 из более чем 70 видов энтеровирусов). Еще одно преимущество ПЦР метода состоит в том, что он позволяет определить инфекцию в ее начальной стадии, тогда как исследования непрямыми методами могут занять 2 – 4 недели. Однако есть у данного метода и недостатки:

• посредством ПЦР невозможно проводить дифференциальную диагностику (т.е. метод не позволяет различить Enterovirus между собой);
• метод ПЦР не позволяет определить также стадию инфекции (острую или хроническую).
• поскольку биологические среды, применяемые в качестве материала для данного исследования, нестерильны, возможно получение ложноотрицательного результата при наличии симптомов энтеровирусной инфекции.

Высокая частота ложноотрицательных результатов объясняется полным вымиранием вируса в клетках желудочно-кишечного тракта к моменту появления клинических признаков заболевания (продолжительность периода размножение вируса в глотке составляет 2-14 дней, в эпителии кишки – до 3 месяцев).

Диагностика инфекции, вызванной Enterovirus, довольно затруднительна, поэтому при ее выявлении рекомендуется применять дополнительные лабораторные методы, а также проводить инструментальное обследование.

Показания к исследованию

Посредством данного исследования проводится диагностика инфекций, ассоциированных с Enterovirus, к которым относятся:

• менингит (характеризуется головной болью, раздражительностью, лихорадкой, светобоязнью, тошнотой, рвотой, не приносящей облегчения, напряжением мышц затылка);
• герпетическая ангина (характеризуется острым началом, высокой температурой и лихорадкой, головной болью, тошнотой и рвотой, болезненностью и увеличением шейных лимфоузлов, появлением сыпи на слизистой миндалин, нёба, болью в горле)
• вирусная пузырчатка полости рта и конечностей (характеризуется лихорадкой, кашлем, появлением везикулезной сыпи на коже стоп, кистей и слизистой оболочке рта);
• миоперикардит (характеризуется одышкой, усиливающейся при вдохе и ослабевающей при наклоне вперед загрудинной болью, периферическими отеками и нарушением сердечного ритма);
• полиомиелит (характеризуется лихорадкой, болью в животе, головной болью, тошнотой, снижем мышечной силы или параличем конечностей или группы мышц, нарушением глотания, пронации (правильности постановки стопы при беге/ходьбе) и пр.).

Тестирование проводится:

• в случаях подозрения на наличие энтеровирусной инфекции, если заболевание протекает тяжело и есть необходимость в уточнении диагноза с применением комплексных методов исследования;
• в рамках эпидемиологических исследований, если имеет место массовое поражение энтеровирусной инфекцией.

Подготовка к исследованию

Кал

За трое суток до сбора материала необходимо прекратить прием антибиотиков. Если отказ от лечения невозможен, пациент обязан указать препарат, который принимает, и период, в течение которого проводилась терапия.

Биоматериал отбирается в пе́рвые дни после появления симптомов инфицирования. Режим питания не перед сдачей анализа не изменяется.

Для анализа отбирается кал, выделенный только естественным способом (без помощи слабительных средств и клизмы). Для этого используется медицинский контейнер с ложечкой и крышечкой (его можно получить в офисе лаборатории «Наука» или самостоятельно купить в аптеке).

Проба не отбирается из унитаза – для этого применяется судно или горшок, прошедшие предварительную обработку: емкость моется мылом (дезинфицирующие средства использовать запрещено), тщательно промывается под проточной водой, обрабатывается кипятком и высушивается. Если названые емкости отсутствуют, кал можно собрать с клеенки, полиэтилена, чистого сухого листа бумаги. К калу не должна примешиваться моча и выделения из половых органов. Кал желательно отбирать из средины порции. Контейнер заполняется на треть объема (достаточное количество – два фрагмента размером с крупную вишню; при жидком стуле – желательно, чтобы в образец попала слизь) и плотно закрывается крышкой.

Доставка биоматериала должна быть осуществлена в течение 2 часов после сбора.

Интерпретация исследования

Данный тест – качественный, его результат выдается в формате «обнаружено» или «не обнаружено».

Референсное значение – «не обнаружено».

Положительный ответ может свидетельствовать:

• о наличии энтеровирусной инфекции;
• о носительстве энтеровируса.

Отрицательный ответ выдается:

• если в биоматериале не обнаружены специфические фрагменты РНК энтеровирусов;
• если концентрация фрагментов РНК энтеровирусов в тестируемой пробе ниже определяемого предела.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович                                       Пол: м            Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000

Литература:

1. Ботвиньева В.В., Намазова-Баранова Л.С., Гордеева О.Б., Ботвиньев О.К., Коноплева Т.Н. Современные возможности диагностики, профилактики и лечения энтеровирусной инфекции Коксаки у детей. Педиатрическая фармакология. - М. 2012;9(3):40-45.

2. Инфекционные болезни у детей. Под ред. Д. Марри. - М.: Изд. «Практика». 2006:928.

3. Эпидемиологический надзор и профилактика энтеровирусных (неполио) инфекций: Методические указания. МУ 3.1.1.2363-08. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. - М. 2008.

4. Kupila L., Vuorinen T., Vainionpõā R., Marttila R.J., Kotilainen P. Diagnosis of Enteroviral Meningitis by Use of Polymerase Chain Reaction of Cerebrospinal Fluid, Stool, and Serum Specimens. Clinical Infectious Diseases. 2005;40(7):982-987.

5. Материалы фирмы-производителя реагентов.