Описание исследования

Род Streptococcus spp. (стрептококки) – это шаровидные или яйцевидные грамположительные факультативно-анаэробные (не нуждающиеся в кислороде, но и не гибнущие в его присутствии) не образующие спор бактерии семейства Streptococcaceae, паразитирующие в организмах людей и животных. Местами их локации являются дыхательные пути, пищеварительная система (особенно рот, нос, толстый кишечник).

Стрептококки классифицируются по типу гемолиза (разрушения эритроцитов), наблюдаемого при росте бактерий на питательных средах, содержащих кровь животных, на:

• альфа-гемолитические стрептококки (или «зеленящие» стрептококки), которые разрушают гемоглобин не полностью; при этом гемолитическая зона приобретает зеленоватый оттенок (откуда и взялось название);
• бета-гемолитические стрептококки вызывают полное разрушение эритроцитов и, в свою очередь, в зависимости от особенностей строения делятся на группы, обозначенные буквами от A до U;
• гамма – негемолитические стрептококки.

К патологически значимым стрептококкам относятся:

• бета-гемолитический стрептококк группы А – Streptococcus pyogenes, локализующийся в глотке;
• пневмококк Streptococcus pneumoniae, паразитирует в дыхательных путях человека, возбудитель пневмонии и бронхита;
• энтерококки (стрептококки группы D) – Streptococcus faecalis, Streptococcus faecies, являются возбудителями септических процессов;
• негемолитические и гемолитические стрептококки, вырабатывающие полисахариды, участвующие в образовании зубных бляшек и, и, предположительно, являющиеся причиной развития кариеса – Streptococcus sanguis, Streptococcus salivarius, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans;
• молочнокислый стрептококк Streptococcus lactis.

Болезни, возбуждаемые стрептококками, отличаются по степени тяжести и месту локализации. К их числу относятся:

• внебольничная пневмония (воспаление легких, возникающее у людей, не имевших вообще или имевших очень мало контактов с медицинскими учреждениями);
• менингит (воспаление оболочек головного и спинного мозга);
• бронхит (воспаление бронхов);
• пневмония (воспаление легких);
• тонзиллит (ангина);
• скарлатина (инфекционное заболевание, характеризуемое появлением мелкоточечной сыпи, лихорадкой, острой ангиной, общим отравлением);
• фарингит (воспаление слизистой и лимфоидной ткани глотки);
• риносинусит (воспаление слизистой носа и околоносовых пазух);
• инфекции мягких тканей;
• рожистое воспаление (острое, часто возобновляющееся инфекционное поражение кожи, характеризуемое покраснением ее участков на лице или голени и сопровождающееся общим отравлением организма);
• стрептодермия (очень заразная бактериальная инфекция кожи, сопровождаемая образованием фликтен – поверхностных плоских образований, покрытых тонкой дряблой корочкой, наполненных сначала серозной жидкостью, а затем, по мере развития – гноем);
• фасциит (воспаление соединительной ткани);
• инфекции мочевого тракта;
• гломерулонефрит (поражение почек, которое может проявляться развитием острой или хронической почечной недостаточности, нефритическим синдромом, изолированной гематурией (присутствием в моче крови без прочих симптомов заболевания или изменения в ее составе) и/или протеинурей (наличием белка в моче));
• острая ревматическая лихорадка или ревматизм (системное заболевание соединительной ткани, поражающее сердечно-сосудистую систему, суставы, провоцирующее развитие кожного и неврологического синдромов у детей в возрасте 7-15 лет);
• миозит (воспаление одной или нескольких скелетных мышц);
• лимфаденит (увеличение лимфатических узлов);
• пародонтит (воспаление тканей, окружающих зуб и удерживающих его в лунке ( альвеоле));
• заеда (заболевание, поражающее слизистую оболочку и углы рта);
• абсцесс (гнойное воспаление тканей, приводящее к их расплавлению и образованию гнойной полости, может поражать не только кожу и клетчатку, но и мышцы, кости, отдельные органы);
• сепсис (опасное для жизни общее воспаление организма, вызванное попаданием бактерии в кровоток).

Особую опасность стрептококковые инфекции представляют для детей и пожилых людей. Заражение обычно происходит при личном контакте с инфицированным лицом либо же воздушно-капельным путем. Максимальное количество заболевших регистрируется в осенне-зимний период, когда сопротивляемость организма снижается и нередки случаи переохлаждения (это является одной из частых причин поражения инфекцией). Также инфицированию способствуют иммунодефицитные состояния, пристрастие к алкоголю или наркотикам.

Менингит, возникающий в результате заражения Streptococcus, не имеет возрастной избирательности и может поразить человека любых лет. У лиц с очень ослабленным иммунитетом велика вероятность развития таких болезней как:

• синусит (воспаление слизистых околоносовых пазух);
• отит (воспаление уха);
• эндокардит (воспаление внутренней оболочки сердца);
• перитонит (воспаление брюшины);
• пиелонефрит (воспаление канальцевой системы почек);
• гнойные инфекции;
• сепсис.

В данном случае перечисленные выше заболевания имеют гематогенную природу, т.е. они возникают при попадании стрептококка в кровь и занесении ею бактерии в поражаемый орган.

Выявление специфических фрагментов ДНК Streptococcus spp. применяется для определения возбудителя инфекции:

• в слюне и клетках эпителия ротоглотки – при пневмонии, фарингите, риносинусите, бронхите, тонзиллите;
• в моче и сперме – при воспалительных заболеваниях мочеполовой системы и почек.

Тестирование проводится методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Аналитические показатели теста:

• исследуемый участок – специфический фрагмент ДНК, характерный для любых видов стрептококков, как определенно болезнетворных, так и условно-патогенных, возбуждающих заболевания только при наличии благоприятных для них факторов;
• специфичность анализа – 100%;
• чувствительность метода – 10 000 геном-эквивалентов в миллилитре.

Подготовка к исследованию

Соскоб урогенитальный (цервикальный канал, влагалище, уретра)

Соскобы у женщин отбираются не ранее пятого дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.

Требования по подготовке к тестированию:

• за день до и непосредственно в день отбора материала запрещено спринцевание влагалища;
• накануне исследования запрещено применение вагинальных препаратов – мазей, свечей и т.п.

Проба не отбирается:

• параллельно с приемом внутрь или местным применением антибиотиков – после окончания курса лечения должно пройти не менее двух недель при местной терапии и 30 дней после внутреннего приема антибактериальных препаратов;
• во время менструации;
• ранее, чем через 24-48 часов после полового контакта;
• после внутривлагалищного УЗИ;
• после колькоскопии (диагностического осмотра входа во влагалище, его стенок и шейки матки при помощи специального прибора – кольпоскопа);
• после мануального исследования и прочих манипуляций.

Мочеиспускательный канал (уретра)

У лиц обоего пола проба отбирается не ранее чем через 14 дней после применения антибиотиков местного действия и 30 дней после перорального приема противобактериальных средств.

За неделю до манипуляции рекомендуется прекратить прием всех медицинских препаратов. Если отказ от лечения невозможен, то пациенту необходимо поставить об этом в известность специалиста, направляющего его на обследование.

За 48 часов не вступать в половые контакты и не мастурбировать.

При отборе эпителиальных клеток из мочеиспускательного канала, манипуляция проводится перед мочеиспусканием или через 2-3 часа после него (при обильных выделениях из уретры у мужчин – через 1 час).

Сперма

Отбор материала с целью диагностики проводится до начала противобактериального, антивирусного и противопаразитарного лечения, химиотерапии, а также до лечебных или диагностических мероприятий в месте предполагаемой локализации агента инфекции. После курса лечения проба отбирается не ранее, чем через 10-14 дней при проведении локальной терапии и через 30 дней после перорального приема антибиотиков.

Сбор спермы (эякулята) проводится посредством мастурбации в стерильный медицинский контейнер, плотно закрывающийся крышкой. Проба не отбирается в ранее использовавшиеся и вымытые или обработанные средствами дезинфекции емкости. Не рекомендуется сдавать анализ при наличии обильных гнойных выделений из мочеиспускательного канала.

После сбора материал может храниться в холодильнике при температуре +2 - +8⁰С, но не более 10-12 часов.

Моча

На анализ собирается порция первой утренней мочи, выделенной не ранее, чем через 2-3 часа после предыдущего (ночного) мочеиспускания. Ее объем должен составлять порядка 20-30 мл. Емкость, используемая для сбора биоматериала – стерильный медицинский контейнер.

Моча собирается либо до проведения химиотерапии или лечения антибиотиками, либо через месяц после окончания курса лечения.

Перед началом манипуляции необходимо тщательно обмыть гениталии. Женщинам желательно воспользоваться гигиеническим тампоном во избежание попадания в пробу слизи из влагалища. Во время менструации материал не собирается.

После наполнения контейнера на треть-половину объема, емкость с мочой плотно закрывается крышкой, дабы избежать ее вытекания.

Доставка биоматериала должна быть организована в течение максимум 6 часов. До отправки в лабораторию моча может храниться как в холодильнике (при t⁰ от +2⁰С – замораживать ее нельзя), так и в комнате, но при этом температура не должна быть выше +25⁰С.

Рот

Соскоб эпителиальных клеток с задней стенки глотки

Перед отбором биологического материала необходимо учесть следующее:

• соскоб клеток, отбираемый с целью диагностики, проводится перед началом применения противобактериальных, антивирусных и противопаразитарных лекарственных средств, а также до проведения любых лечебных или диагностических мероприятий;
• отбор пробы для наблюдения за эффективностью проводимой терапии осуществляется минимум через полторы-две недели после окончания использования лекарственных средств местного действия и минимум через месяц после общего лечения.

Подготовка к взятию соскоба включает в себя:

• запрет на применение препаратов для рассасывания и/или аэрозолей для орошения ротоглотки в течение 6 часов, предшествующих отбору пробы;
• запрет на использование для освежения дыхания жевательной резинки или пастилки, а также на чистку зубов.

Перед проведением соскоба необходимо прополоскать рот, используя для этого воду комнатной температуры.

Для получения корректного результата тестирования все эти условия необходимо соблюсти в точности. Лечащий врач может рекомендовать иные условия проведения обследования.

Слюна

Для проведения тестирования необходимо собрать порцию слюны. Сбор и транспортировка биоматериала осуществляется:

• у взрослых – в стерильном контейнере (приобретается в аптеке);
• у детей – в микропробирке без транспортной среды емкостью 2 мл.

Перед отбором пробы не рекомендуется:

• применение орошающих и рассасываемых препаратов (минимум за 6 часов до обследования);
• чистка зубов, освежение дыхания жвачкой или пастилкой.

Проведение химиотерапевтического или противобактериального лечения назначается после обследования или до него, но с окончанием курса терапии не менее чем:

• за 10-14 дней (локальная терапия);
• за 30 дней (общая терапия с применением пероральных антибиотиков).

Прежде, чем отбирать слюну, необходимо трижды прополоскать рот, применяя для этого физиологический раствор или кипяченую воду.

Для отбора пробы у детей можно использовать шприц без иглы маленького объема. Для анализа достаточно половины микропробирки (1 мл). Слюна отбирается в защечном пространстве.

После сбора материала контейнер необходимо плотно закрыть крышкой. Микропробирка закрывается до щелчка.

Отобранный материал доставляется в лабораторию в день сбора. Если нет возможности отправить его сразу, необходимо поместить контейнер с образцом в холодильник и хранить его там при температуре от 2 до 8⁰С, но не дольше 10-12 часов.

Показания к исследованию

Тестирование проводится:

• для диагностики пневмонии (воспаления легких); бронхита (воспаления бронхов); фарингита (воспаления слизистой и лимфоткани глотки); тонзиллита (ангины); риносинусита (воспаления слизистой носа и околоносовых пазух);
• при длительном, не поддающемся лечению мокром кашле, сопровождаемом субфебрильной (37,1-38,0⁰С) температурой;
• при легочных заболеваниях, не сопровождаемых явными симптомами;
• при обследовании пациентов с дефицитом иммунитета;
• для установления причин развития инфекционного процесса мочеполовой системы;
• для диагностики бактериемии (наличия бактерий в крови);
• для определения причин развития эндокардита;
• при гнойничковых поражениях кожи;
• при поражении суставов после перенесенной ангины;
• для оценки эффективности проведенного антибактериального лечения.

Интерпретация исследования

Данный тест – качественный, результат выдается в формулировках «обнаружено» или «не обнаружено».

Нормой является отсутствие в исследуемой пробе специфических фрагментов ДНК Streptococcus spp.

Положительный результат:

• в исследуемых образцах обнаружены специфические фрагменты ДНК Streptococcus spp., что свидетельствует об инфицировании бактерией.

Отрицательный результат:

• специфические фрагменты ДНК Streptococcus spp. не обнаружены;
• количество агента инфекции ниже порога обнаружения.

Результат анализа выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример результата по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович                                       Пол: м            Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000

Исследование	Результат	Нормы интерпретации	Примечание
ПЦР
[32] Streptococcus spp. [кач]	Не обнаружено	Не обнаружено

Литература:

1. Руководство по инфекционным болезням/под ред. Ю.В. Лобзина – СПб. 200 – 936 с.

2. McPherson R., Pincus M. Henry´s clinical diagnosis and management by laboratory method (21Th ed.) – Saunders, 2007 – pp. 1020 - 3.

3. Методики клинических лабораторных исследований т.3/под ред. В.В.Меньшикова М.2009 с. с.147-157.