Описание исследования
Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ или g-герпервирус 4 типа) входит в семейство герпервирусов наряду с вирусом простого гепатита 1 и 2 типов, вирусом ветряной оспы, цитомегаловирусом, а также вирусами 6, 7 и 8 типов.
В рамках данного теста выявление специфических фрагментов ДНК вируса Эпштейна-Барр, осуществляется посредством метода ПЦР (полимеразной цепной реакции). Он состоит в многократном увеличении количества фрагментов ДНК в исследуемой пробе. Наблюдение за процессом проходит в режиме реального времени. В качестве исследуемого материала могут быть использованы:
- эпителиальные клетки внутренней поверхности щеки или нёба (соскоб буккального эпителия);
- эпителиальные клетки цервикального канала, влагалища, мочеиспускательного канала (соскоб урогенитальный);
- эпителиальные клетки глотки (соскоб с задней стенки);
- эпителиальные клетки слизистой носа (соскоб из полости носа);
- моча;
- сперма;
- слюна.
Вирус Эпштейна-Барр провоцирует развитие ряда заболеваний. Доподлинно известно, что при инфицировании этим вирусом вызывает развитие инфекционного мононуклеоза*. Также есть предположение, что под воздействием ВЭБ из лимфоидных клеток развивается злокачественная опухоль. Он же, по некоторым данным, является причиной синдрома хронической усталости.
Наличие в пробе биоматериала ДНК вируса Эпштейна-Барр говорит об острой инфекции. Используемый метод исследования (ПРЦ) особенно актуален при обследовании младенцев, у которых иммунная система еще малофункциональна. Также он полезен при получении сомнительного результата или при нетипичном течении болезни.
*Мононуклеоз – это инфекционное заболевание, симптомы которого во многом сходны с ангиной или простудой (одно из названий патологии – моноцитарная ангина). Чаще всего оно поражает детей 3-10-летнего возраста, но может наблюдаться и у взрослых. Передается инфекция воздушно-капельным путем. Действие вируса распространяется на лимфоидную ткань, печень, селезенку. Инкубационный период у детей сопровождается высокой температурой.
Подготовка к исследованию
Соскоб буккального эпителия
Исследование проводится до проведения антибактериальной терапии.
Проба отбирается до приема пищи и проведения гигиенической обработки ротовой полости.
Соскоб берется медработником с внутренней поверхности щеки (буккального эпителия) или неба с помощью ворсинчатого зонда.
Соскоб урогенитальный
Цервикальный канал, влагалище
Соскобы у женщин отбираются не ранее 5 дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.
Требования по подготовке к тестированию:
- за день до и непосредственно в день отбора материала запрещено спринцевание влагалища;
- накануне исследования запрещено применение вагинальных препаратов – мазей, свечей и т.п.
Проба не отбирается:
- параллельно с приемом внутрь или местным применением антибиотиков – после окончания курса лечения должно пройти не менее двух недель при местной терапии и 30 дней после внутреннего приема антибактериальных препаратов;
- во время менструации;
- ранее, чем через 24-48 часов после полового контакта;
- после внутривлагалищного УЗИ;
- после колькоскопии (диагностического осмотра входа во влагалище, его стенок и шейки матки при помощи специального прибора – кольпоскопа);
- после мануального исследования и прочих манипуляций.
Мочеиспускательный канал (уретра)
У лиц обоего пола проба отбирается не ранее чем через 14 дней после применения антибиотиков местного действия и 30 дней после перорального приема противобактериальных средств.
За неделю до манипуляции рекомендуется прекратить прием всех медицинских препаратов. Если отказ от лечения невозможен, то пациенту необходимо поставить об этом в известность специалиста, направляющего его на обследование.
За 48 часов не вступать в половые контакты и не мастурбировать.
При отборе эпителиальных клеток из мочеиспускательного канала, манипуляция проводится перед мочеиспусканием или через 2-3 часа после него (при обильных выделениях из уретры у мужчин – через 1 час).
Соскоб с задней стенки глотки
Соскоб рекомендуется отбирать в предполагаемом месте расположения возбудителя до начала терапии и диагностики.
Обследование проводится перед началом лечения, если оно предполагает применение противовирусных, противопаразитарных, антибактериальных средств.
При обследовании с целью наблюдения за эффективностью терапии отбор пробы проводится через 10-14 дней после курса лечения средствами местного действия и не менее чем через 30 дней после внутривенного введения соответствующих препаратов.
Перед отбором соскоба запрещается:
- минимум за 6 часов применять аэрозольные средства и лекарственные препараты для рассасывания;
- чистить зубы, жевать жвачку или пастилки, освежающие дыхание.
Непосредственно перед отбором пробы рекомендуется прополоскать рот водой комнатной температуры.
Соскоб эпителиальных клеток слизистой носа
Соскоб рекомендуется брать в предполагаемом месте расположения возбудителя до начала терапии и диагностики. Отбор пробы биоматериала нецелесообразно проводить во время антибактериального лечения.
Подготовка к исследованию
Используется микропробирка полипропиленовая типа "Эппендорф" с транспортной средой для ПЦР. За 3-4 часа до взятия мазков не закапывать капли/спреи и не промывать нос.
Не рекомендуется применение интраназальной (закапываемой в нос) вакцины для профилактики сезонного гриппа в течение 7 дней до исследования.
Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна. Мазки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. Не использовать тампоны из натуральной ваты или тампоны, помещенные в какую-либо транспортную среду, содержащую уголь, агар или желатин. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание.
Моча
Порция утренней мочи, необходимой для исследования, отбирается не ранее, чем через 2-3 часа после ночного мочеиспускания. Для сбора и доставки ее в лабораторию используется стерильный медицинский контейнер с крышкой, который можно получить в пункте забора биоматериала или купить в аптеке самостоятельно.
Важно! Моча собирается до применения химиотерапевтических и антибактериальных средств или через 30 дней (минимум) после завершения лечения.
Сбор биоматериала проводится после тщательной гигиенической обработки наружных половых органов. Женщинам рекомендуется при этом пользоваться гигиеническим тампоном во избежание попадания выделений влагалища в мочу. Не рекомендуется отбирать пробу во время менструации.
Контейнер заполняется мочой на треть или половину объема и плотно закрывается крышкой. Замораживать мочу нельзя! Перед доставкой в лабораторию разрешается хранение материала не более 6 часов! Контейнер может храниться в холодильнике (не ниже +2⁰С) или при комнатной температуре (не выше +25⁰С).
Важно! Доставка биоматериала должна быть осуществлена как можно быстрее после его сбора.
Сперма
Проба спермы отбирается обследуемым лицом самостоятельно.
Важно! Сперма отбирается только в новый контейнер, который раньше не использовался и не подвергался обработке, т.к. смешивание остатков моющих и дезинфицирующих средств с исследуемым материалом может привести к искажению результатов. Контейнер должен плотно закрываться крышкой во избежание потери биоматериала.
Условия подготовки к тестированию следующие:
- отбор пробы проводится не ранее чем через 2 дня после последнего полового акта;
- прием химиотерапевтических или антибактериальных препаратов является противопоказанием к проведению обследования: отбор пробы осуществляется строго до начала их применения или после окончания приема местных антибиотиков – не ранее чем через полторы-две недели, а после орального приема антибиотиков – минимум через месяц;
Проба спермы до отправки в лабораторию хранится в холодильнике при температуре от +2 до +8⁰С, но не более 10-12 часов. Материал обязательно должен быть доставлен в день сбора – на следующий день он не пригоден для обследования.
Важно! Если имеют место обильные гнойные выделения из мочевого канала, то сбор биоматериала проводить не имеет смысла – для исследования он не принимается.
Слюна
Биоматериал рекомендуется отбирать в предполагаемом месте расположения возбудителя до начала терапии и диагностики.
Обследование проводится перед началом лечения с применением противовирусных, противопаразитарных, антибактериальных средств.
При обследовании с целью наблюдения за эффективностью терапии отбор пробы проводится через 10-14 дней после курса лечения средствами местного действия и не менее чем через 30 дней после внутривенного введения соответствующих препаратов.
Перед отбором слюны запрещается:
- применение аэрозольных средств и лекарственных препаратов для рассасывания (минимум за 6 часов);
- чистить зубы, жевать жвачку или пастилки, освежающие дыхание.
Непосредственно перед взятием соскоба рекомендуется прополоскать рот, используя для этого воду комнатной температуры или физиологический раствор.
Слюна отбирается в стерильный контейнер (взрослые) или пустую микропробирку емкостью 2 мл (дети). После сбора биоматериала контейнер (микропробирка) плотно закрывается крышкой во избежание вытекания слюны.
Отобрать пробу у ребенка можно с помощью стерильного 2-5-тимиллилитрового шприца без иглы. Слюна берется в защечном пространстве. Микропробирка заполняется не меньше, чем на половину объема (минимальная порция, необходимая для анализа – 1 мл).
Собранная слюна хранится в холодильнике при температуре не ниже +2 и не выше +8⁰С. Если нет возможности доставить ее немедленно после сбора, то срок хранения биоматериала не должен превышать 10-12 часов. Слюна доставляется на исследования в тот же день, в который была собрана.
Интерпретация исследования
Тест по выявлению фрагментов ДНК ВЭБ является качественным. Результат выдается в одной из формулировок: «обнаружено» или «не обнаружено».
Референсное значение – не обнаружено.
Интерпретация результатов:
При положительном ответе (обнаружении в исследуемом материале характерных для вируса Эпштейна-Барр участков ДНК) дается заключение о заражении организма ВЭБ.
Отрицательный ответ предусматривает два возможных варианта:
- характерные фрагменты ДНК вируса в пробе отсутствуют;
- тест недостаточно чувствительный для обнаружения малой концентрации агентов вируса.
Если возникает необходимость в проведении дополнительных тестов, срок выдачи ответа может быть продлен.
Аналитические показатели:
- предмет исследования – характерный фрагмент ДНК вируса Эбштейна-Барр;
- специфичность теста – 100%
- чувствительность – 100 копий участков ДНК вируса в отобранной пробе.
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000
|
Исследование
|
Результат
|
Нормы интерпретации
|
Примечание
|
|
ПЦР
|
|
[69] Вирус Эпштейна-Барр [кач.]
|
не обнаружено
|
не обнаружено
|
|
