Описание исследования

В акушерско-гинекологической практике периодически возникает необходимость раннего определения генотипа плода. Раньше материал для исследования отбирался при биопсии хориона или плаценты методом кордоцентеза (инвазивной пренатальной диагностики, в ходе которого производится пункция сосудов пуповины для получения пробы крови) или амниоцентеза (инвазивном методе, заключающемся в пункции амниотической оболочки для получения околоплодных вод). Данные способы отбора материала для лабораторных исследований в 2-3% создавали грозу самопроизвольного аборта.

В 1997 году были открыты фетальные (плодные, от англ. «fetal» - плод) ДНК* и РНК, а в 2000 году было доказано наличие в плазме крови циркулирующих РНК. На основании этих открытий были разработаны методы неинвазивной (без проникновения внутрь) предродовой диагностики.

При увеличении срока беременности количество фетальных клеток возрастает. Также на их количество оказывают влияние состояние плаценты и индивидуальные особенности протекания беременности. Определение пола ребенка на раннем сроке проводится с целью предотвращения рождения больных детей в семьях, где имеют место тяжелые наследственные заболевания. При наличии у родителей генов заболеваний, сцепленных с полом ребенка (к таковым относятся, например, прогрессирующая мышечная дистрофия Дюшенна/Беккера, нарушение свертываемости крови (гемофилия)) и при неблагоприятном прогнозе для жизни ребенка, консилиумом врачей может быть рекомендовано прерывание беременности.

Еще одна цель раннего установления пола ребенка – определение возможности проведения гормонального лечения будущей мамы, страдающей врожденной дисплазией коры надпочечников или другими патологиями желез внутренней секреции, вызывающих маскулинизацию (накопление у женщины вторичных половых признаков по мужскому типу).

Ультразвуковое исследование (УЗИ) было и остается основным методом определения пола ребенка, однако на малых сроках оно не информативно и часто ошибочно. В отличие от УЗИ, выявление в крови женщины мультикопийного фрагмента Y хромосомы плода методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени, достаточно точно свидетельствует о мужском поле вынашиваемого ребенка (пол определяется набором половых хромосом: ХХ у женщин или XY у мужчин).

ПЦР-анализ имеет ряд преимуществ, а именно:

• не требует внутреннего вмешательства, поэтому не угрожает течению беременности и не приводит к осложнениям;
• позволяет выявить пол ребенка на малом сроке беременности (от 10 недель);
• обладает высокой (96-100%) точностью результата (на него влияет количество фрагментов ДНК ребенка в плазме матери, которое определяется состоянием плаценты, течением беременности и повышается по мере увеличения срока).

Аналитические показатели ПЦР-теста:

• определяемый показатель – мультикопийный фрагмент Y-хромосомы;
• специфичность исследования – 90-100%;
• чувствительность исследования – 92-100%.

*Циркулирующие внеклеточные плодные ДНК - это короткие участки плодных нуклеиновых кислот, циркулирующих в материнской плазме и сыворотке, которые наблюдаются иногда в несвязанной форме, свободными от обычных клеточных компонентов.

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки данное исследование не предусматривает. Кровь рекомендуется сдавать утром натощак или не ранее, чем через 4 часа после последнего приема пищи. Можно пить негазированную воду. От употребления чая, кофе, соков лучше воздержаться.

Общие рекомендации:

• на результате исследования могут отразиться физические и эмоциональные нагрузки, поэтому накануне желательно от них воздержаться;
• за сутки до отбора пробы запрещено употребление спиртных напитков, за час – курение;
• по согласованию с лечащим врачом целесообразно временно прекратить прием лекарств, которые могут исказить результат тестирования;
• желательно перед сдачей крови 10-15 минут спокойно посидеть.

Не рекомендуется сдавать кровь после массажа, физиопроцедур, мануального, ультразвукового, ректального, инструментального, рентгеновского обследований, гастроскопии, кольпокопии, флюорографии, прочих диагностических и лечебных манипуляций.

Показания к исследованию

Тестирование проводится:

1. с целью определения тактики лекарственной терапии при наличии у беременных женщин маскулинизирующих эндокринных заболеваний (в частности таких, как врожденная дисфункция коры надпочечников (ВДКН));

2. при наличии вероятности носительства генов гемофилии (нарушения свертываемости крови в результате отсутствия одного из факторов свертывания: VIII (гемофилия A) или IX (гемофилия B);

3. при наличии других заболеваний, сцепленных с полом у женщин:

• умственной отсталости, связанной с Х-хромосомой;
• миодистрофии (генетического заболевания, характеризуемого прогрессирующей слабостью мышц и потерей мышечной массы);
• адренолейкодистрофии (генетического заболевания, характеризуемого прогрессирующим ухудшением состояния мальчиков, приводящего к потере способности ходить, разговаривать и есть без посторонней помощи);
• синдрома Альпорта (наследственной патологии почек);
• иммунодефицита, связанного с Х-хромосомой;
• пигментного ретинита (наследственного дегенеративного заболевания глаз, вызывающего значительное ухудшение зрения и часто слепоту);
• гидроцефалии (скопления лишней спинномозговой жидкости в полых пространствах (желудочках) внутри головного мозга, что приводит к увеличению их размеров и чрезмерному давлению на мозг), связанной с Х-хромосомой;
• синдрома Лоу (генетически обусловленного заболевания, возникающего при нарушении структуры или работы цилий – постоянных компонентов клеток, необходимых для их существования);
• X-связанного ихтиоза (заболевания кожи, сопровождающегося различной степенью ее шелушения и образования чешуек (от легкой, но беспокоящей больного, сухости кожи до тяжелого заболевания, превращающего человека в инвалида)) и др.;

4. при подозрении по результатам УЗИ на нарушения детерминации пола (развитие половых характеристик) плода.

Исследование не проводится:

• после трансплантации органов и тканей от донора мужского пола;
• при инверсии пола (хромосомной перестройке, при которой происходит поворот участка хромосомы на 180°) с наличием Y-хромосомы у матери (в том числе мозаичных форм).

Интерпретация исследования

Интерпретация результата осуществляется на основании выявления или не выявления фрагмента Y-хромосомы:

• наличие фрагмента Y-хромосомы – высокая вероятность мужского пола плода;
• отсутствие фрагмента Y-хромосомы – высокая вероятность женского пола плода.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванова Инна Петровна  Пол: ж                        Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата исследования: хх.хх.хххх

Литература:

1. Инструкция по применению набора реагентов для выявления фрагмента Y хромосомы плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени. Пол плода. ДНК-технология.

2. Избранные клинические рекомендации по неонатологии. Под ред. Е.Н. Байбариной, Д.Н. Дегтярева. - М.: Изд. «ГЕОТАР-Медиа». 2016. 237.