Описание исследования
Туберкулез (в переводе с латыни «бугорок») является распространенным заболеванием, поражающим не только людей, но и животных. Степень его распространения зависит от социальных условий. Палочку, являющуюся возбудителем туберкулеза, открыл в конце 19 века немецкий микробиолог Роберт Кох. Она насчитывает 74 вида и относится к семейству микобактерий (Мycobacterium). Этим микроорганизмам для жизнедеятельности необходим кислород, они устойчивы к кислоте, к воздействию многих факторов внешней среды, обнаруживаются в почве, воде. Носителями бактерий могут быть также животные.
Самым активным «человеческим» агентом инфекции является род Mycobacterium tuberculosis, следующий за ним – Mycobacterium bovis. Оба представителя микобактерий не только устойчивы к воздействию внешних факторов, но и проявляют поразительную жизнеспособность в организме человека – они могут спровоцировать болезнь через много лет после инфицирования. Одна из особенностей данных возбудителей инфекции – способность образовывать L-формы, наличие которых способствует выработке противотуберкулезного иммунитета.
Туберкулез – очень коварная болезнь. Она может долго никак не проявляться и обнаружиться случайно, хотя косвенно дает о себе знать слабостью, быстро наступающей усталостью, субфебрильной температурой (37,1-38⁰С), ночной потливостью, а при исследовании крови – анемией (малокровием – уменьшением ниже пороговых значений количества кровяных клеток, переносящих кислород) и лейкопенией (снижением концентрации лейкоцитов в единице объема крови). На сегодняшний день, несмотря на серьезный прорыв в области противомикробной терапии, туберкулез все также имеет угрожающе широкое распространение. Поэтому очень важно выявлять бессимптомную инфекцию как можно раньше.
В лабораториях туберкулез диагностируют посредством микроскопии мазка (как правило, мокроты), классического бактериологического метода, метода иммуноферментного анализа. При всех их очевидных достоинствах, во всех методиках есть один общий изъян – невозможность обнаружить микобактерии при их низкой концентрации.
Одним из последних в диагностике начал применяться метод полимеразной цепной реакции, отличающийся высокой чувствительностью. Посредством его можно определить не только наличие целых клеток, но также и отдельных участков ДНК возбудителя. Еще одно преимущество ПЦР – отсутствие перекрестных реакций, что делает метод практически 100% специфичным. Кроме того, с помощью данного метода можно делать выборочную диагностику, позволяющую отличать локальную инфекцию от диссеминированной (рассеянной, распространенной). Наиболее точно это возможно сделать при обследовании детей, даже после отрицательных результатов микробиологических тестов.
Посредством обнаружения ДНК микобактерий туберкулеза в синовиальной (суставной) жидкости проводится ускоренная диагностика туберкулеза костей и суставов. Выявление фрагментов ДНК, характерных для микобактерий туберкулеза M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum, проводится с применением метода полимеразной цепной реакции (ПЦР). Наблюдение за процессом осуществляется в режиме реального времени. Исследуемый биоматериал – синовиальная (суставная) жидкость (густая и эластичная субстанция, заполняющая полости суставов).
Аналитические показатели теста:
- исследуемый участок – характерный для Mycobacterium tuberculosis фрагмент ДНК;
- специфичность анализа – 100%;
- чувствительность метода – 100 копий ДНК микобактерий в тестируемой пробе.