Описание исследования

Influenza virus (вирус гриппа) включает три типа вирусов, вызывающие у людей заболевание – A, B и C. Первые два типа становятся причинами сезонных эпидемий и пандемий (распространения заболевания в мировых масштабах). Инфицирование типом С проявляется слабо, его симптомы похожи на клиническое проявление простуды. Данный тип, в отличие от A и B не представляет серьезной опасности.

Частица вируса гриппа имеет форму сферы, внутри которой в РНК «упакована» ее генетическая информация. Оболочка частицы содержит сложные поверхностные белки - нейраминидазу (N) и гемагглютинин (Н). В вирусах гриппа типа А эти белки постоянно изменяются. В настоящее время выявлено 9 вариаций нейтраминидазы и 15 вариаций гемагглютинина. Субтип вируса определяется определенным сочетанием поверхностных белков. Возбудителями сезонных вспышек гриппа являются субтипы H1N1 и H3N2.

Попавший в организм человека вирус гриппа проникает в эпителиальные клетки слизистой органов дыхания и начинает в них размножаться. Это приводит к разрушению, гибели и отторжению зараженных клеток, которые вместе с вирусными частицами попадают в слизь, мокроту и прочее отделяемое дыхательных путей.

Исследование, предназначенное для определения субтипа вируса гриппа, проводится методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Посредством данного теста в биологическом материале обнаруживаются специфические фрагменты РНК вируса. Последующий синтез участков вирусной РНК приводит к образованию очень большого количества копий, что позволяет легко их обнаружить даже визуально.

Преимущество метода ПЦР состоит:

• в возможности определения присутствия возбудителя инфекции – обнаружение специфического фрагмента РНК вируса прямо свидетельствует об инфицировании;
• в высокой специфичности, т.к. обнаруживаемый фрагмент РНК характерен только для конкретного вируса;
• в высокой чувствительности, т.к. посредством реакции можно выявить агента инфекции даже при совсем незначительной начальной концентрации.

Подготовка к исследованию

Мазок из носа и ротоглотки

Нос

Оптимальным временем отбора пробы является утро, сразу после ночного сна. Перед проведением манипуляции необходимо освободить нос от слизи (если таковая имеется). Для выполнения процедуры применяется стерильный сухой зонд с ватными тампонами (вата не должна быть натуральной, тампон не должен быть помещен в транспортную среду). Возможен отбор пробы ворсинчатым зондом.

Перед отбором мазка из носа запрещено:

• за 3-4 часа промывать полость носа, пользоваться спреем или каплями;
• за неделю до проведения обследования применять закапываемую в нос вакцину для профилактики сезонного гриппа.

Ротоглотка

Соскоб с задней стенки глотки не проводится на фоне приема противобактериальных, противопаразитарных и противовирусных препаратов. Материал рекомендуется отбирать до проведения диагностики и локальной терапии в предполагаемом месте присутствия агента инфекции.

При обследовании с целью наблюдения за эффективностью терапии отбор пробы проводится через 10-14 дней после курса лечения средствами местного действия и не менее чем через 30 дней после внутривенного введения соответствующих препаратов.

Перед отбором соскоба в ротоглотке запрещается:

• применять аэрозольные средства и лекарственные препараты для рассасывания (минимальный срок выдержки – 6 часов);
• чистить зубы, жевать жвачку или пастилки, освежающие дыхание.

Непосредственно перед выполнением манипуляции необходимо прополоскать рот, используя для этого воду комнатной температуры.

Слюна

Обследование проводится перед началом лечения с применением противовирусных, противопаразитальных, антибактериальных средств.

Если исследование проводится с целью наблюдения за эффективностью терапии, отбор пробы проводится через 10-14 дней после курса лечения средствами местного действия и не менее чем через 30 дней после внутривенного введения соответствующих препаратов.

Перед отбором слюны:

• запрещается применение аэрозольных средств и лекарственных препаратов для рассасывания (минимальны срок выдержки – 6 часов);
• запрещается чистить зубы, жевать жвачку или пастилки, освежающие дыхание;
• рекомендуется трижды прополоскать рот, используя для этого воду кипяченую комнатной температуры или физиологический раствор.

Слюна отбирается в стерильный контейнер (взрослые) или пустую микропробирку емкостью 2 мл (дети). После сбора биоматериала контейнер (микропробирка) плотно закрывается крышкой во избежание вытекания слюны.

Отобрать пробу у ребенка можно с помощью стерильного 2-5-тимиллилитрового шприца без иглы. Слюна берется в защечном пространстве. Микропробирка заполняется не меньше, чем на половину объема (минимальная порция, необходимая для анализа – 1 мл).

Собранная слюна хранится в холодильнике при температуре не ниже +2 и не выше +8⁰С. Если нет возможности доставить ее немедленно после сбора, то срок хранения биоматериала не должен превышать 10-12 часов. Слюна доставляется на исследования в тот же день, в который была собрана.

Мокрота

Мокрота собирается в стерильный контейнер, который можно получить в пункте отбора биоматериала или самостоятельно купить в аптеке.

Обследование осуществляется строго до начала проведения антибактериальной терапии.

Накануне исследования (за 8-12 часов) рекомендуется употребить большой объем жидкости (питье должно быть теплым). Для облегчения откашливания следует принять отхаркивающие препараты.

Для стимулирования кашля разрешается надавить на корень языка.

Важно! Собранная мокрота замораживается, хранится и транспортируется только в таком состоянии.

Показания к исследованию

Тестирование проводится с целью идентификация субтипа вируса гриппа в случаях, если:

• имеет место нетипичные проявления заболевания;
• существует высокая вероятность развития осложнений после гриппа (в группу риска входят дети до 2-х лет, взрослые после 65 лет, беременные, женщины в течение 14 недель после родов, пациенты, страдающие хроническими заболеваниями почек, легких, сердца, лица с иммунодефицитом, а также с анемиями, гемобластозами, лучевой болезнью и другими заболеваниями кровеносной системы);
• необходимо идентифицировать возбудителя инфекции у лиц, заболевших не в эпидемический сезон.

Интерпретация исследования

Данный тест является качественным. Ответ выдается в формулировке «обнаружено» или «не обнаружено».

Нормой является отсутствие в исследуемой пробе специфических фрагментов РНК вируса гриппа.

Положительный результат свидетельствует об инфицировании обследуемого лица вирусом гриппа А определенного субтипа.

Отсутствие в пробе фрагментов вирусного ДНК является показателем отсутствия инфекции.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович                                       Пол: м            Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000