Описание исследования

Туберкулез (в переводе с латыни «бугорок») является распространенным заболеванием, которое среди инфекционных заболеваний до сих пор держит первенство по количеству смертей. Палочку, являющуюся возбудителем туберкулеза, открыл в конце 19 века немецкий микробиолог Роберт Кох. Она насчитывает 74 вида и относится к семейству микобактерий (Мycobacterium). Этим микроорганизмам для жизнедеятельности необходим кислород, они устойчивы к кислоте, к воздействию многих факторов внешней среды, обнаруживаются в почве, воде. Носителями бактерий могут быть также животные.

Развитие туберкулеза происходит под воздействием Mycobacterium tuberculosis и Mycobacterium bovis – «человеческого» и «бычьего» типа микобактерий. Инфицирование Mycobacterium tuberculosis чаще происходит воздушно-капельным путем, Mycobacterium bovis – через продукты питания (в т.ч. молоко). Заразиться туберкулезом можно при непосредственном контакте с инфицированным человеком (например, через поверхность раны). Больная туберкулезом мать является источником инфекции для вынашиваемого ребенка.

Названые представители микобактерий не только устойчивы к воздействию внешних факторов, но и проявляют поразительную жизнеспособность в организме человека – они могут спровоцировать болезнь через много лет после инфицирования. Одна из особенностей данных возбудителей инфекции – способность образовывать L-формы, наличие которых способствует выработке противотуберкулезного иммунитета.

Туберкулез – очень коварная болезнь. Первичное инфицирование проходит, как правило, бессимптомно. Инфекция может долго никак не проявляться и обнаружиться случайно. Однако по мере развития она дает о себе знать слабостью, быстро наступающей усталостью, субфебрильной температурой (37,1-38⁰С), ночной потливостью, снижением массы тела, а при исследовании крови – анемией (малокровием – уменьшением ниже пороговых значений количества кровяных клеток, переносящих кислород) и лейкопенией (снижением концентрации лейкоцитов в единице объема крови). В 10% случаев туберкулез протекает в активной форме. Ее развитию способствуют:

• ослабленный иммунитет (особенно ВИЧ-инфекция);
• сахарный диабет;
• терминальная почечная недостаточность;
• онкологические заболевания и пр.

На сегодняшний день, несмотря на серьезный прорыв в области противомикробной терапии, туберкулез все также имеет угрожающе широкое распространение. Отсутствие нормальных социальных, экономических, санитарно-гигиенических условий значительно увеличивают риск расширения круга заболевших данной инфекцией. Для предотвращения распространения туберкулеза очень важно выявлять его бессимптомную форму как можно раньше.

В лабораториях туберкулез диагностируют посредством микроскопии мазка (как правило, мокроты), классического бактериологического метода, метода иммуноферментного анализа. При всех их очевидных достоинствах, во всех методиках есть один общий изъян – невозможность обнаружить микобактерии при их низкой концентрации.

Одним из последних в диагностике начал применяться метод полимеразной цепной реакции, отличающийся высокой чувствительностью. Посредством его можно определить не только наличие целых клеток, но также и отдельных участков ДНК возбудителя. Еще одно преимущество ПЦР – отсутствие перекрестных реакций, что делает метод практически 100% специфичным. Кроме перечисленного, с помощью данного метода можно делать выборочную диагностику, позволяющую отличать локальную инфекцию от диссеминированной (рассеянной, распространенной). Наиболее точно это возможно сделать при обследовании детей, даже после получения отрицательных результатов микробиологических тестов.

В рамках данного теста методом полимеразной цепной реакции определяется наличие специфических фрагментов ДНК Mycobacterium tuberculosis-bovis в следующих видах биоматериала:

• в соскобе урогенитальном (из цервикального канала или уретры);
• в соскобе с задней стенки глотки;
• в соскобе с конъюнктивы глаза;
• в сперме;
• в моче.

Аналитические показатели:

• исследуемый участок – характерный для Mycobacterium tuberculosis фрагмент ДНК;
• специфичность анализа – 100%;
• чувствительность метода – 100 копий ДНК микобактерий в тестируемой пробе.

Подготовка к исследованию

Соскоб урогенитальный

Урогенитальный соскоб у женщин берется:

• не ранее чем черед 1-2 дня после окончания менструации или перед ее началом;
• в день обращения при наличии явных признаков воспаления.

Перед взятием соскоба и непосредственно в день обследования запрещено:

• спринцевание;
• применение вагинальных лекарственных средств (мазей, свечей и пр.)

Материал не отбирается:

• во время менструации;
• во время курса лечения антибактериальными средствами локального или общего действия;
• в течение 1-2 суток после полового акта, внутривлагалищного УЗИ, колькоскопии и прочих манипуляций.

При отборе пробы из мочеиспускательного канала, после последнего опорожнения мочевого пузыря должно пройти не менее 1,5-2 часов.

У лиц обоего пола проба отбирается не ранее чем через 14 дней после применения антибиотиков местного действия и 30 дней после перорального приема противобактериальных средств.

Соскоб с задней стенки глотки

Отбор пробы не проводится на фоне приема противобактериальных, противопаразитарных и противовирусных препаратов. Материал рекомендуется отбирать до проведения диагностики и локальной терапии в предполагаемом месте присутствия агента инфекции.

При обследовании с целью наблюдения за эффективностью терапии отбор пробы проводится через 10-14 дней после курса лечения средствами местного действия и не менее чем через 30 дней после внутривенного введения соответствующих препаратов.

Перед отбором соскоба в ротоглотке:

• запрещается применение аэрозольных средств и лекарственных препаратов для рассасывания (минимальны срок выдержки – 6 часов);
• запрещается чистить зубы, жевать жвачку или пастилки, освежающие дыхание;
• рекомендуется прополоскать рот, используя для этого воду комнатной температуры.

Условия подготовки к исследованию могут быть изменены по усмотрению лечащего врача.

Соскоб с конъюнктивы глаза

Соскоб не отбирается во время приема противобактериальных препаратов. Материал рекомендуется отбирать до проведения диагностики и локальной терапии в предполагаемом месте присутствия агента инфекции.

Моча

Для проведения анализа предоставляется порция утренней мочи, собранная в стерильный контейнер, не ранее чем через 2-3 часа после ночного мочеиспускания.

Моча собирается строго до проведения противобактериальной и химиотерапевтической терапии или спустя месяц после окончания лечения.

Перед сбором мочи необходимо провести тщательную гигиену наружных половых органов. Женщинам рекомендуется применять гигиенический тампон, дабы избежать попадания в мочу выделений из влагалища. Небольшая порция мочи спускается в унитаз, средняя порция собирается в контейнер, а остатки также сливаются в унитаз.

Минимальное количество мочи, необходимой для анализа – 10 мл. Контейнер рекомендуется заполнять на половину-треть объема, после чего плотно закрыть крышкой во избежание пролития мочи.

Материал может сохраняться в комнате или в холодильнике (допустимая температура хранения – от +2⁰ до +25⁰С). Доставка мочи в лабораторию должна быть осуществлена не более чем через 6 часов.

Сперма

Проба спермы отбирается обследуемым лицом самостоятельно.

Важно! Сперма отбирается только в новый контейнер, который раньше не использовался и не подвергался обработке, т.к. смешивание остатков моющих и дезинфицирующих средств с исследуемым материалом может привести к искажению результатов. Контейнер должен плотно закрываться крышкой во избежание потери биоматериала.

Условия подготовки к тестированию следующие:

• отбор пробы проводится не ранее чем через 2 дня после последнего полового акта;
• прием химиотерапевтических или антибактериальных препаратов является противопоказанием к проведению обследования: отбор пробы осуществляется строго до начала их применения или после окончания приема местных антибиотиков – не ранее чем через полторы-две недели, а после орального приема антибиотиков – минимум через месяц;

Проба спермы до отправки в лабораторию хранится в холодильнике при температуре от +2 до +8⁰С, но не более 10-12 часов. Материал обязательно должен быть доставлен в день сбора – на следующий день он не пригоден для обследования.

Важно! Если имеют место обильные гнойные выделения из мочевого канала, то сбор биоматериала проводить не имеет смысла – для исследования он не принимается.

Аспират из полости матки

Подготовка определяется лечащим врачом. Исследование берет только врач!

Показания к исследованию

Целью данного тестирования является:

• диагностика легочных форм туберкулеза, а также туберкулеза мочеполовой системы;
• наличие симптомов, характерных для данной инфекции;
• наличие отклонений, выявленных при проведении рентгеновского обследования;
• ранее выявление рецидивов туберкулеза;
• наличие перенесенного туберкулеза в истории болезни обследуемого лица;
• диагностика бесплодия при отсутствии отклонений со стороны гинекологии;
• выявление причин воспаления эндометрия (внутренней слизистой оболочки тела матки);
• диагностика причин гиперчувствительности или анергии (полного отсутствия реакции) после введения туберкулиновой пробы;
• диагностика острых заболеваний органов дыхания и дыхательных путей после продолжительного контакта в прошлом с туберкулезным больным;
• наблюдение за эффективностью проводимого лечения.

Интерпретация исследования

Данный тест – качественный, поэтому результат выдается в одной из двух формулировок: «обнаружено» или «не обнаружено».

Референсное значение – «не обнаружено».

Положительный результат свидетельствует об обнаружении в исследуемых образцах биоматериала специфических фрагментов ДНК Mycobacterium tuberculosis-bovis, что расценивается как инфицирование микобактериями.

Обнаружение фрагментов ДНК нежизнеспособных после проведения лечения микобактерий может привести к получению ложноположительного результата.

Отрицательный ответ может быть получен по следующим причинам:

• в исследуемых пробах специфические фрагменты ДНК микобактерий не обнаружены;
• содержание генетического материала возбудителя инфекции ниже определяемого значения.

Результат анализа выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример результата по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович                                       Пол: м            Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000

Литература

1. Макаревич А.Э. Заболевания органов дыхания – М. Высшая школа, 2000. – 368 с.

2. Jacobs D. et al. Laboratory test handbook/ Lexi-Comp./2002 - pр. 828 - 829.