Описание исследования

Коронавирус SARS-CoV-2 (Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus 2) – это РНК-содержащий вирус, входящий в семейство Coronaviridae. Он является возбудителем синдрома COVID-19 – острого респираторного заболевания с потенциально тяжелым течением. Своё название коронавирус получил благодаря входящим в состав его наружной оболочки S-гликопротеинам, имеющим форму шипов и придающим ему внешнее сходство с короной.

Предполагается, что первоисточником вируса были подковоносые летучие мыши, поскольку у них отмечается наличие генетически близких к SARS-CoV-2 штаммов коронавирусов. Также есть мнение, что промежуточными хозяевами вируса могут быть другие животные. Однако на данный момент главным распространителем заболевания является уже заболевший человек или бессимптомный переносчик инфекции.

Передача вирусной инфекции осуществляется несколькими путями:

• воздушно-капельным;
• воздушно-пылевым;
• контактным (через рукопожатие, непосредственный контакт, поверхности, предметы обихода, пищевые продукты, загрязненные вирусом).

Наиболее распространенным является воздушно-капельный путь инфицирования. Заражение в этом случае происходит при чихании, кашле, общении на расстоянии менее 1,5 метров.

Симптомы коронавирусной инфекции аналогичны клиническим проявлениям большинства острых респераторных вирусных заболеваний. Инфицирование достаточно часто сопровождается:

• высокой температурой и лихорадкой;
• сухим или с небольшим количеством мокроты кашлем с наличием или отсутствием боли в горле;
• затрудненным дыханием, одышкой;
• ощущением заложенности в груди.

В некоторых случаях заболевание может сопровождаться насморком, головной болью, тошнотой, поносом, слабостью, болью в мышцах. Поскольку вирус способен поражать клетки головного мозга, то на ранней стадии болезни может наблюдаться полная потеря обоняния и вкусовых ощущений.

Практика показала, что инфицирование может протекать бессимптомно (количество бессимптомных носителей вируса составляет приблизительно 20% от общего числа лиц, пораженных коронавирусом). Наиболее частыми бессимптомными носителями вируса являются дети и молодые люди. Также известен целый ряд случаев, когда лица, длительно и не единожды контактировавшие с больными COVID-19, сами не заболевали. Над объяснением этого феномена трудятся ученые всего мира.

Существует ряд версий данного явления, среди которых наиболее вероятной представляется наличие у определенной части населения индивидуальных особенностей иммунного ответа на действие SARS-CoV-2.

В организме человека существует два типа иммунитета:

• гуморальный (приобретаемый посредством выработки организмом антител класса IgM и IgG);
• клеточный (обеспечиваемый клетками иммунной системы без участия антител).

Важными участниками клеточного иммунного ответа являются Т-клетки (Т-лимфоциты), обеспечивающие сопротивляемость организма к различным инфекциям. Т клетки в иммунологии обозначают CD с добавлением цифровых индексов для обозначения их характерных маркеров (например, CD-3, CD-4, CD-8, CD-16 и пр.). В задачи Т-лимфоцитов входит:

• опознание и изучение агента инфекции;
• передача информации о нем другим звеньям иммунной системы;
• уничтожение агента инфекции;
• его запоминание.

У определенной части людей Т-клеточное звено иммунной системы вероятнее всего при незначительном количестве возбудителя инфекции обезвреживает его, не активируя сколько-нибудь значительным образом В-клеточное звено иммунитета, отвечающее за образование антител. В результате у таких лиц антитела вырабатываются в неопределяемых рутинными лабораторными методами количествах. При этом также отсутствуют и симптомы заболевания. Таким образом заражение инфекцией не вызывает появления симптомов и образования значительного количества антител, однако организм приобретает защиту от повторного заражения (реальную длительность этой защиты на сегодняшний день определить не представляется возможным).

Исследования ученых разных стран позволили обнаружить интересные факты:

• у большинства пациентов, инфицированных коронавирусом, образовался на него устойчивый Т-клеточный ответ;
• у определенной части обследованных лиц, не инфицированных SARS-CoV-2, присутствовали Т-клетки, которые реагируют на коронавирус и выводят его из организма.

Предположительно, это можно объяснить тем, что Т-лимофоциты, активировавшиеся другими, более ранними видами коронавирусов, сохранили иммунологическую память, что стало причиной появления приобретенной резистентности к SARS-CoV-2.

Также исследования показали, что у подавляющего числа лиц с бессимптомной формой инфицирования или перенесших инфекцию в легкой и средне-тяжелой форме, устойчивый Т-клеточный иммунитет к коронавирусу может сохраняться до полугода. Данный факт обнадеживает в отношении длительности Т-клеточного иммунитета к SARS-CoV-2 и позволяет предполагать его способность предотвратить повторное инфицирование.

Для проведения анализа Т-клеточного иммунитета в данном тесте применяется метод ELISPOT, к преимуществам которого относится:

• уникальность;
• проверенный метод в обнаружении активных Т-клеток, что позволяет измерить силу иммунного ответа на инфекцию;
• применение технологии при разработке вакцин против коронавируса исследователями разных стран;
• определение необходимости вакцинации и оценка эффективности иммунного ответа после ее проведения;
• абсолютная безопасность теста – к его проведению нет никаких противопоказаний.

Определение Т-клеточного иммунитета проводится так:

• в исследуемой венозной крови отделяются Т-лимфоциты (эти клетки способны не только уничтожить вирус, но также стимулировать выработку антител);
• к определенным Т-клеткам добавляются вирусные белки;
• если Т-клеткам вирус знаком, то они выделяют цитокины (небольшие пептидные информационные молекулы);
• при появлении более 12 спотов можно говорить о наличии Т-клеточного иммунитета.

Традиционные серологические методы диагностики, не смотря на распространенность, обладают рядом недостатков, среди которых невозможность судить при их отсутствии о степени защищенности организма. В этом отношении определение Т-клеточного иммунитета значительно информативнее, поскольку Т-клетки быстрее реагируют на инфицирование, чем антитела. Кроме того определение клеточного иммунитета позволяет оценить долгосрочность защиты организма от коронавируса.

Обратите внимание!

Кровь на COVID-19 сдается строго по записи. Записаться можно:

• на сайте компании «Наука», перейдя по следующим ссылкам:

Самара https://naykalab.ru/land3/covid.php;

Саратов https://naykalab.ru/land3/covid.php?region=saratov;

Пенза https://naykalab.ru/land3/covid.php?region=penza#pcr;

Оренбург https://naykalab.ru/land3/covid.php?region=oren;

Ульяновск https://naykalab.ru/land3/covid.php?region=ul;

Сызрань https://naykalab.ru/land3/covid.php?region=szr и заполнив форму внизу страницы;

• заказав обратный звонок;
• позвонив в любую лабораторию клиники «Наука» в вашем городе по указанным на сайте телефонам;
• через Call-центр по телефону +7 (846) 2-77-77-03 (04).

Подготовка к исследованию

Забор крови производится утром строго натощак, не ранее чем через 8-14 часов после вечернего приема пищи. Разрешено пить только чистую воду без газа (не минеральную). От употребления чая, кофе, соков и прочих напитков необходимо воздержаться.

Общие рекомендации:

• перед проведением обследования необходимо исключить психоэмоциональные и физические нагрузки (в том числе посещение плавательных бассейнов, спортивных залов, сауны и т.п.);
• за сутки до забора крови запрещено употребление алкогольных напитков (в т. ч. пива);
• за час до исследования запрещается курение;
• накануне обследования не переедать;
• перед сдачей крови необходимо проконсультироваться у лечащего врача о возможном влиянии принимаемых лекарственных средств на результат проводимого исследования;
• строго по согласованию с лечащим врачом прекратить прием тех медицинских препаратов, которые могут исказить результат (с учетом времени их выведения из организма), а в случае невозможности отмены – предупредить об этом работников лаборатории;
• непосредственно перед отбором пробы желательно провести в спокойствии 10-15 минут.

Внимание! Кровь на анализ не отбирается после внутримышечных и внутривенных инъекций, физиотерапевтических процедур, массажа, переливания крови, флюорографии, кольпоскопии, гастроскопии, биопсии, пункции, рентгеновского, мануального, инструментального, ректального, ультразвукового исследования, электрокардиограммы, других терапевтических и/или диагностических манипуляций.

Важно! При проведении исследований в динамике сдачу крови рекомендуется осуществлять в одной и той же лаборатории, в одно и то же время суток, максимально соблюдая условия подготовки к тестированию (режим питания, физических нагрузок и т.д.).

Показания к исследованию

Тестирование рекомендуется применять:

• для обследования лиц, перенесших коронавирусную инфекцию, но в крови которых не обнаружены антитела к вирусу SARS-CoV-2;
• для обследования лиц, инфицирование которых коронавирусом подтверждается наличием симптомов болезни и результатами КТ при отсутствии в крови антител;
• для обследования лиц, контактировавших с больными коронавирусной инфекцией;
• для обследования людей, прошедших иммунопрофилактику (т. е. тех, кому были сделаны профилактические прививки в целях предупреждения, ограничения распространения и ликвидации инфекции).

Интерпретация исследования

В проводимом исследовании определяется наличие Т-клеточного иммунитета к двум панелям антигенов коронавируса:

• панель 1 – пептиды S-белка;
• панель 2 – пептиды белков N, M, O3, O7.

Данный тест качественный. По каждой исследуемой панели проводится оценка наличия Т-клеток. Исходя из полученного результата, делается заключение о наличии/отсутствии Т-клеточного иммунитета и выдается соответственная формулировка – «положительный», «пограничный» «отрицательный»:

• положительный – от 12 и выше;
• пограничный – 11-12;
• отрицательный – до 10 включительно.

Получение отрицательного результата свидетельствует об отсутствии Т-клеточного иммунитета.

Положительный ответ означает, что в исследуемой пробе содержатся Т-клетки (Т-лимфоциты) специфически отвечающие на определенные антигены SARS-CoV-2. Их присутствие может быть показателем:

• текущей инфекции;
• перенесенного в прошлом заболевания (в т. ч. в бессимптомной форме);
• сформировавшегося Т-клеточного иммунитета к коронавирусу.

Примечание. Последние исследования показали, что наличие выраженного Т-клеточного иммунитета к SARS-CoV-2 наблюдается у серонегативных лиц (т.е. тех, у которых отсутствуют антитела к агенту инфекции), часто контактировавших с больными COVID-19, но при этом не заболевших.

Пограничный ответ не дает полного основания утверждать наличиие/отсутствие в исследуемой пробе Т-клеток, специфически отвечающих на антигены коронавируса. Для уточнения состояния Т-клеточного иммунитета исследование рекомендуется провести повторно через 4 недели.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Сидор Петрович  Пол: м    Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата исследования: хх.хх.хххх

Литература:

1. Amanat F, Nguyen T, Chromikova V, et al. A serological assay to detect SARS-CoV-2 seroconversion in humans. medRxiv 2020: 2020.03.17.20037713.

2. Fei Xiang, Xiaorong Wang, Xinliang He, Zhenghong Peng, Bohan Yang, Jianchu Zhang, Qiong Zhou, Hong Ye, Yanling Ma, Hui Li, Xiaoshan Wei, Pengcheng Cai, Wan-Li Ma, Antibody Detection and Dynamic Characteristics in Patients with COVID-19, Clinical Infectious Diseases, ciaa 461.