Описание исследования

Гены HLA II класса (human leucocyte antigens – человеческие лейкоцитарные антигены) – это гены тканевой совместимости (гистосовместмости). Они расположены на коротком плече 6 хромосомы и представлены рядом кластеров (групп, включающих повторы одного и того же или родственных генов, расположенных рядом на хромосоме, входящих в состав мультигенного семейства): RA, DRB, DQA, DQB, DPA, DPB и пр – в общей сложности к ним относятся 24 гена. Эти гены характеризуются значительным многообразием форм (полиморфизмом) в популяции. Наиболее значимыми в клинической практике считаются 3 гена: DRB1 (на сегодняшний день сделано описание порядка 440 аллелей (форм гена, расположенных на одном участке парных хромосом), DQA1 (около 25 аллелей), и DQВ1 (порядка 57 вариантов аллелей). Каждому аллелю присвоен свой номер, идентифицируемый при типировании.

У человека каждый участок хромосомы представлен парой генов. Результатом действия генов является образование полипептидных цепей альфа (от генов с маркером А) и бета (с маркером В), которые формируют единую активную структуру на поверхности клеток – HLA-молекулу II класса. Как правило, они располагаются на специальных антигенпрезентирующих клетках (т. е. клетках, которые экспонируют («выставляют на обозрение») чужеродные антигены) – макрофагах, В-клетках, дендритных клетках. В комплексе с HLA-молекулами II класса антигенпрезентирующие клетки играют важную роль в генетическом контроле распознавания чужеродных агентов и являются участниками подавляющего большинства иммунных реакций, вызывая их нарушение или способствуя их развитию.

Значительное количество заболеваний (к ним, в частности, относятся онкологические, воспалительные, дистрофические) обусловлено нарушением работы иммунной системы человека. Функциональные сбои приводят к возникновению патологий и их клиническому проявлению. Некоторые аллели генов гистосовместимости человека II класса также могут обусловливать повышенный риск развития ряда заболеваний (например, гепатита В, ревматоидных заболеваний, аутоиммунного тиреоидита и пр.). Их типирование проводится для расчета вероятности развития заболеваний среди лиц, входящих в группы риска. Например:

• у носителей аллеля HLA-DRB1*1302 наблюдается повышенная способность к элиминации вируса гепатита В;
• у носителей аллеля DR4 повышен риск развития ревматического артрита, а наличие у них аллеля DR2 является защитным фактором;
• у носителей аллелей DQ8 и DQ2 высокий риск развития инсулинозависимого сахарного диабета, особенно при наличии обеих форм гена.

Сахарный диабет I типа – это заболевание с наследственной предрасположенностью, определяемой «неудачной» комбинацией нормальных генов, большая часть которых отвечают за контроль определенных этапов аутоиммунных процессов.

Гены предрасположенности к сахарному диабету 1 типа расположены на разных хромосомах – на сегодняшний день известно 15 локаций. Предполагается, что самыми значимыми являются именно гены HLA II класса.

Риск развития сахарного диабета у членов семьи пациента с патологией составляет:

• 4-5% - у детей, рожденных о отцов с диабетом;
• 2-3% - у детей, рожденных больными матерями;
• приблизительно 4% - у родных братьев или сестер.

В зависимости от количества членов семьи с диабетом I типа, риск его развития у здоровых детей составляет:

• 10-12% - при наличии двух детей или ребенка и родителя диабетиков;
• более 30% - при наличии диабета у обоих родителей.

В зависимости от возраста, в котором сахарный диабет был обнаружен у ребенка, риск для здоровых членов его братьев и сестер составляет:

6,5% - при начале болезни в 0-20 лет;

1,2% - в возрасте 20-40 лет.

Степень риска развития сахарного диабета 1 типа также определяется по степени HLA-идентичности больного ребенка со здоровыми братьями, сестрами:

• порядка 18% (наиболее высокий риск) – при полной идентичности;
• 3% - при идентичности 50%;
• ниже 1% - при полном отсутствии совпадений.

Выделение групп различного риска развития диабета посредством исследования генетических маркеров, позволяет определить тактику ранней доклинической диагностики заболевания.

Аллели генов HLA II класса, ассоциированные с риском развития диабета 1 типа:

a) с высоким риском:

• DRB1*0301;
• DRB1*0401        DQA1*0501;
• DQA1*0301       DQB1*0201;
• DQB1*0302;

b) со средним риском:

• DRB1*01;
• DRB1*0801;
• DRB1*0901;
• DRB1*1001        DQA1*0101;
• DQA1*0401;
• DQA1*0301;
• DQA1*0301       DQB1*0501;
• DQB1*0402;
• DQB1*0303;
• DQB1*0501.

Высоко протективные аллели:

• DRB1*1501;
• DRB1*1101        DQA1*0102;
• DQA1*0501       DQB1*0602;
• DQB1*0301.

Аллели, влияние которых среднее протективное:

• DRB1*0401;
• DRB1*0403;
• DRB1*0701        DQA1*0301;
• DQA1*0301;
• DQA1*0201       DQB1*0301;
• DQB1*0302;
• DQB1*0201.

Поскольку диабет I и II типов не связаны ни генетически, ни нозологически, то наличие у члена семьи неинсулинозависимого диабета не может стать причиной развития у его родственников инсулинозависимого диабета.

Еще одно применение типирования генов гистосовместимости человека (HLA) II класса – диагностика нарушения фертильности супружеской пары (некоторых видов бесплодия и оценки риска невынашивания беременности). В основе диагностики лежит определение количества совпадений аллелей генов гистосовместимости II класса у мужа и жены: большее количество совпадений снижает вероятность наступления беременности.

Кроме определения генетической предрасположенности развития сахарного диабета, диагностики некоторых форм бесплодия и оценки риска ранней потери плода при беременности данный тест в обязательном порядке проводится при подборе донора в случае необходимости трансплантации костного мозга или донора крови и ее компонентов для гипериммунизированного пациента. Однако данный вид исследования проводится только в специализированных клинических учреждениях.

Подготовка к исследованию

Кровь

Забор крови производится утром, желательно натощак, или не ранее чем через 4-6 часов после последнего приема пищи. Разрешено пить чистую воду без газа (не минеральную). От употребления чая, кофе, соков и прочих напитков рекомендуется воздержаться.

Общие рекомендации:

• за 24-48 часов до обследования желательно исключить психоэмоциональные и физические нагрузки (в том числе посещение плавательных бассейнов, спортивных залов, сауны и т.п.);
• за сутки до забора крови запрещено употребление алкогольных напитков (в т. ч. пива);
• за час до исследования запрещается курение;
• строго по согласованию с лечащим врачом перед сдачей крови на анализ рекомендуется прекратить или свести к минимуму прием любых лекарственных препаратов;
• непосредственно перед отбором пробы желательно провести в спокойствии 10-15 минут.

Внимание! Кровь на анализ не отбирается после внутримышечных и внутривенных инъекций, физиотерапевтических процедур, массажа, переливания крови, флюорографии, кольпоскопии, гастроскопии, биопсии, рентгеновского, мануального, инструментального, ректального, ультразвукового исследования, электрокардиограммы, других терапевтических и/или диагностических манипуляций.

Буккальный (щечный) эпителий

Соскоб с буккального эпителия отбирается с обеих щек ворсинчатым зондом. Процедуру желательно проводить натощак. За полчаса до отбора пробы запрещается:

• принимать пищу;
• пить;
• курить;
• жевать жевательную резинку;
• полоскать рот.

Показания к исследованию

Типирование генов гистосовместимости человека (HLA) II класса рекомендуется проводить:

a) для обследования доноров перед трансплантацией органов и тканей;

b) для оценки риска инсулинозависимого сахарного диабета (Iтипа) при наличии в семье случаев заболевания;

c) для оценки риска бесплодия и невынашивания беременности при планировании семьи;

d) для выявления генетической предрасположенности:

• к аутоиммунному тиреоидиту (воспалению щитовидной железы);
• к системной красной волчанке (аутоиммунному диффузное поражению соединительной ткани, ее производных, сосудов микроциркулярного русла);
• к аутоиммунному гепатиту (воспалительному заболеванию печени);
• к первичному билиарному циррозу (хроническому заболеванию, при котором вследствие нарушения процессов иммунной регуляции происходит постепенное разрушение иммунной системой человека внутрипеченочных желчных протоков как чужеродных антигенов);
• к целиакии (генетически предрасположенности к непереносимости глютена – основного белка клейковины, содержащегося в семенах злаковых растений, особенно в пшенице, ржи, ячмене);
• к хронической идиопатической крапивнице (патологии, характеризуемой появлением на без явной причины коже зудящих волдырей, длящейся не менее 6 недель).

Интерпретация исследования

Поскольку цель данного теста – исследование полиморфизма гена, то в результате нет указаний на «норму» или «патологию». Он применяется для определения вероятности развития патологии, расчет риска которой осуществляется только врачом-генетиком. Полученную при этом информацию лечащий врач может использовать для постановки диагноза, назначения других видов исследований, коррекции проводимого лечения.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванов Сидор Петрович  Пол: м     Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата исследования: хх.хх.хххх

Литература:

1. Д. А. Чистяков, И. И. Дедов «Локус генетической предрасположенности к диабету 1 типа (Сообщение 1) «Сахарный диабет» №3, 1999г.

2. Болдырева М.Н.»HLA (класс II) и естественный отбор. «Функциональный» генотип, гипотеза преимущества «функциональной» гетерозиготности». Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук, 2007.

3. Особенности дебюта и прогноз сосудистых осложнений у больных медленно прогрессирующим диабетом взрослых (Latent Autoimmune Diabetes in Adults – LADA). Пособие для врачей. Под редакцией директора ЭНЦ РАМН, академика РАМН профессора И. И. Дедова. – Москва. - 2003. - 38 с.

4. Болдырева М. Н., Барцева О. Б., Курило Л. Ф., Ткаченко Э. Р., Алексеев Л. П., Адамян Л. В. Связь HLA-DRB1-генотипа с репродуктивными неудачами. Проблемы репродукции, 2010, № 6. Стр. 59-63.

5. Барковский Д. HLA-система и нейроиммуноэндокринные факторы. Влияние на беременность и роды. Издательство Медпрактика-М, 2014. Стр. 374.