Описание исследования
EBV (ВЭБ, вирус Эпштейна-Барр, вирус герпеса человека 4 типа) – это ДНК-содержащий вирус семейства герпевирусов, подсемейства Gammaherpesvirinae, рода Gymphocryptovirus. Свое название он получил по именам открывших его в 1964 году канадских ученых – М. Эпштейна и И. Барр.
Отличительная особенность вируса Эпштейна-Барр – репликация (самоудвоение молекул ДНК) в В-лимфоцитах (преимущественно), не вызывающая разрушения клеток. Также вирус может внедряться в Т-лимфоциты и эпителиальные клетки слизистых оболочек организма, что приводит к поражению половой и дыхательной системы, органов пищеварения. Основными агентами инфекции являются:
- IEA – предранний антиген;
- ЕA – ранний антиген;
- VCA – антиген вирусного капсида (внешней белковой оболочки);
- EBNA – ядерный антиген;
- MA – мембранный антиген.
Разносчиком инфекции является носитель ВЭБ или заболевший человек. Наиболее часто заражение происходит воздушно-капельным путем, при попадании зараженной слюны в здоровый организм. Также причиной инфицирования может стать употребление зараженных вирусом продуктов питания, пользование общими с больным человеком предметами обихода, половой контакт с ним, вливание зараженной донорской крови.
На сегодняшний день доказан факт широчайшего распространения вируса среди населения Земли. В некоторых странах уровень прошлого или настоящего инфицирования населения ВЭБ составляет 90-95%. В РФ инфекцией заражены 50% детей в возрасте до 5 лет и 95% взрослых. Нормально функционирующая иммунная система не дает вирусу «развернуться», поэтому его наличие в организме может клинически никак не проявляться. В таких случаях он обнаруживается только при проведении серологических тестов (исследовании наличия специфических антител к ВЭБ). Патология иммунной системы, иммунодефицит, применение препаратов, подавляющих иммунитет, на фоне вируса Эпштейна-Барр может стать причиной развития целого ряда заболеваний и патологических состояний, в числе которых:
- онкологические болезни (например, назофарингеальная карцинома, лимфома Беркитта, лимфогранулематоз);
- лимфопролиферативные нарушения (поражение узлов лимфатической системы организма);
- B-клеточная лимфома;
- некоторые аутоиммунные заболевания;
- синдром хронической усталости;
- заметное увеличение размеров селезенки и печени.
Однако чаще всего вирус вызывает развитие инфекционного мононуклеоза (ИМ), причем более половины случаев заболевания приходится на лиц в возрасте 2-20 лет. У детей до 4-х лет инфекция, как правило, не проявляется совсем или носит форму респираторной вирусной инфекции. У более возрастных лиц инфицирование сопровождается появлением типичных симптомов ИМ.
Характерное начало острого инфекционного мононуклеоза проявляется повышением температуры тела до 38-40°C. Она может держаться в течение 5-30 дней и сопровождается ознобом, головной, иногда мышечной, суставной болью. Также инфекция поражает зев, глоточные и небные миндалины. Гиперплазия носоглотки приводит к заложенности носа и затруднению дыхания. У детей болезнь часто сопровождается ангиной и фарингитом. Характерным признаком поражения вирусом Эпштейна-Бар является также увеличение лимфоузлов (в первую очередь шейного отдела). Через полторы-две недели лимфоузлы могут самопроизвольно уменьшиться в размерах, но припухлость может оставаться на протяжении недель или месяцев. При инфицировании ВЭБ также происходит увеличение печени и селезенки, достигающее пика на 10-14 дней от начала болезни.
Анализ крови инфицированного лица показывает повышенный уровень лейкоцитов, среди которых преобладающее место занимают лимфо-нуклеарные клетки с характерной широкой и базофильной цитоплазмой. Одни мононуклеары имеют нормальную форму, другие отличаются атипичностью и полиморфностью. Наличие в крови 10-20% атипичных клеток дает основание для подозрения на инфекционный мононуклеоз.
Поскольку изменение в крови могут сопровождать и другие инфекции (например, цитамегаловирусную, токсоплазмоз, ветряную оспу, инфекционные гепатиты, корь), то уточненная диагностика инфекционного мононуклеоза требует проведения специальных дополнительных исследований.
Раннюю фазу острого инфекционного мононуклеоза, характеризуемую отсутствием в крови специфических антител к агенту инфекции, диагностируют методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. При проведении теста материал выбирается в зависимости от симптомов инфекции.
Из серологических (выявляющих характерные антитела) тестов наиболее информативными являются определение антител класса IgG и IgM к антигену вирусного капсида (VCA), антител IgG к раннему (EA) и ядерному (EBNA) антигену. Проведение этих тестов в сочетании с расчетом индекса авидности IgG к VCA позволяет абсолютно точно выявить инфицирование ВЭБ и определить стадию инфекции.
Авидность – это характеристика общей прочности соединения антитела с антигеном, зависящей от силы воздействия антитела на антиген (аффинности антитела), количества центров в молекуле антитела, способных связать антиген (связывающих участков), а также от пространственного объема самого антигена, который оказывает влияние на ход химической реакции, затрудняя ее.
Определение авидности антител класса IgG базируется на разделении антител на две группы: обладающие высокой и низкой связывающей способностью. Для этого на соединение антител с антигенами воздействуют раствором, нарушающим структуру молекулы белков, что приводит к нарушению слабых связей низкоавидного антитела с антигеном и не повреждает связь высокоавидного антитела с антигеном. Для оценки авидности используется расчетный показатель – индекс авидности. Он равен отношению количества антител после обработки пробы раствором, разрушающим связь антитело-антиген, к количеству антител до введения раствора.
При первичном инфицировании ранняя стадия ВЭБ характеризуется присутствием в крови низкоавидных антител класса G к VCA. По мере их созревания прочность связывания возрастает, что отражается повышением индекса авидности. Пост-инфекция характеризуется наличием в крови пациента высокоавидных антител IgG к VCA, что позволяет исключить недавнее первичное заражение вирусом. Исследование и расчет индекса авидности производится только при выявлении в крови специфических иммуноглобулинов G к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр.